O que é o GHRP-2 (pralmorelin)? Estrutura, mecanismo e panorama da investigação

O GHRP-2, também catalogado como pralmorelin, é um hexapéptido sintético agonista do recetor dos secretagogos da hormona de crescimento GHS-R1a, com a sequência D-Ala-D-2-Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2 — um aperfeiçoamento de segunda geração do esqueleto do GHRP-6, no qual uma D-2-naftilalanina na posição 2 aumentou acentuadamente a potência. Ocupa uma posição histórica específica: o GHRP-2 foi um dos compostos que provaram que tinha de existir um recetor distinto do recetor da GHRH, anos antes de a grelina ser identificada como o seu ligando natural. É também o único membro da classe com uma aprovação regulamentar em algum lado, tendo sido autorizado no Japão como agente de diagnóstico para avaliar a secreção de hormona de crescimento.

Esta página aborda a estrutura e o contributo de cada modificação, o mecanismo do recetor, a investigação publicada e a forma como o material é especificado e manuseado.

Origem e estrutura: um hexapéptido de segunda geração

A série de péptidos libertadores da hormona de crescimento começou com trabalho sobre análogos da met-encefalina na década de 1980, que produziu o GHRP-6, His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2. A descoberta de que estes fragmentos derivados de opioides libertavam hormona de crescimento através de um mecanismo que os antagonistas da GHRH não conseguiam bloquear implicava um recetor desconhecido, e a química medicinal que se seguiu procurou maior potência sobre o mesmo esqueleto.

O GHRP-2 é o produto desse esforço. Duas alterações distinguem-no do GHRP-6. A primeira é a substituição do D-triptofano da posição 2 por D-2-naftilalanina — uma cadeia lateral aromática bicíclica em vez de um indol, maior e mais hidrofóbica, e a alteração mais responsável pelo aumento de potência. A segunda é a D-alanina no N-terminal em vez da histidina, o que elimina a cadeia lateral de imidazol e, mais importante, coloca um resíduo D na posição que as aminopeptidases atacam primeiro. O resto do esqueleto é conservado: o triptofano na posição 4, a D-fenilalanina na posição 5 e a lisina amidada na posição 6 são comuns a ambos os compostos e à hexarelin.

Com 817,97 g/mol, o GHRP-2 situa-se entre a ipamorelin, com 711,85, e o GHRP-6, com 873,01. Os três são suficientemente pequenos para que as quantidades molares por miligrama sejam elevadas em comparação com qualquer análogo da GHRH, o que é a razão prática pela qual frascos de 5 mg e 10 mg cobrem uma grande quantidade de trabalho.

Como se pensa que o GHRP-2 atua

O GHRP-2 é um agonista do GHS-R1a, um recetor acoplado a proteína G da classe A expresso nos somatotrofos hipofisários e no hipotálamo. A ocupação do recetor ativa a Gq, que estimula a fosfolipase C, gera trifosfato de inositol e diacilglicerol e aumenta o cálcio intracelular, desencadeando a libertação dos grânulos secretores. Um segundo contributo descrito é a supressão do tónus somatostatinérgico, que levanta um travão inibitório ao mesmo tempo que é aplicado o sinal estimulador. O recetor apresenta também uma elevada atividade constitutiva na ausência de ligando, razão pela qual tem tanto destaque na farmacologia dos agonistas inversos.

A característica clinicamente relevante do GHRP-2 na literatura comparativa é que os seus efeitos não se limitam à hormona de crescimento. Estudos publicados descrevem aumentos de prolactina, ACTH e cortisol a par da libertação de hormona de crescimento, mais do que com a ipamorelin com potência equivalente de libertação de hormona de crescimento. Se isso é uma desvantagem depende inteiramente da experiência: é um fator de confusão num estudo que isola a sinalização dos somatotrofos, e é o próprio fenómeno em estudo em trabalho sobre o envolvimento do recetor dos secretagogos no eixo hipotálamo-hipófise-suprarrenal. O GHRP-2 foi também descrito como tendo um efeito mais fraco na sinalização do apetite do que o GHRP-6, que é o eixo em que os dois hexapéptidos mais antigos mais diferem entre si.

O que a investigação examinou

Descoberta e caracterização do recetor

O GHRP-2 é um dos compostos-ferramenta que estabeleceram o GHS-R1a como alvo distinto do recetor da GHRH antes de se conhecer o ligando endógeno. Continua a ser um agonista de referência padrão em ensaios de ligação, experiências de fluxo de cálcio e de acumulação de fosfatos de inositol e na ordenação de potências na classe dos secretagogos da hormona de crescimento.

Endocrinologia de diagnóstico

A pralmorelin está aprovada no Japão como agente de diagnóstico para avaliar a capacidade secretora de hormona de crescimento, em que um estímulo definido com uma resposta previsível é exatamente o que se pretende. Trata-se de uma autorização de diagnóstico para um produto farmacêutico administrado sob supervisão médica, e não se transfere para material de grau de investigação.

Farmacologia comparativa dos secretagogos

Quase todos os estudos que ordenam esta classe incluem o GHRP-2, habitualmente a par do GHRP-6, da hexarelin e da ipamorelin. O contraste de seletividade com a ipamorelin é examinado em ipamorelin vs GHRP-2.

Desenhos de combinação

Como o GHS-R1a e o recetor da GHRH atuam na mesma célula através de segundos mensageiros diferentes, associar um secretagogo a um análogo da GHRH é um desenho experimental padrão; existe material de investigação pré-misturado sob a forma de CJC-1295 com GHRP-2. Qualquer estudo deste tipo deve indicar ambas as concentrações molares, uma vez que os dois péptidos diferem em massa molecular cerca de quatro vezes.

Formas e formatos fornecidos

O GHRP-2 está disponível como pó liofilizado em frascos selados de 5 mg (50 €) e 10 mg (80 €). Com 817,97 g/mol, um frasco de 5 mg contém aproximadamente 6,11 micromoles, cerca de quatro vezes o conteúdo molar de um frasco de 5 mg de um análogo da GHRH — a razão pela qual as comparações baseadas na massa entre os dois sistemas de recetores são enganadoras. A classe encontra-se em GHRP e secretagogos.

Reconstituição e armazenamento em contexto laboratorial

O cálculo: um frasco de 5 mg reconstituído com 2 mL de água bacteriostática dá 2,5 mg/mL, o equivalente a 2500 mcg/mL; 0,1 mL (10 unidades numa seringa U-100) contêm 250 mcg. Em termos molares, a solução-mãe tem aproximadamente 3,06 mM, pelo que um ensaio a 10 nanomolar requer uma diluição de cerca de 300 000 vezes, realizada por etapas e não num único passo.

O GHRP-2 não tem cisteína, metionina nem asparagina, o que elimina os problemas de dissulfuretos, oxidação e desamidação que dominam as discussões de estabilidade noutros casos. A sua única sensibilidade é o triptofano na posição 4: as cadeias laterais de indol são fotossensíveis e podem degradar-se com exposição prolongada à luz, o que é uma razão prática, e não meramente preventiva, para manter tanto o pó como a solução protegidos da luz. As duas grandes cadeias laterais aromáticas tornam também o péptido menos hidrofílico do que o seu tamanho sugere, pelo que se deve deixar o bolo dissolver completamente e verificar a limpidez. Os frascos liofilizados são conservados a −20 °C protegidos da luz e da humidade; a solução reconstituída é refrigerada e dividida em alíquotas. Os pormenores estão no guia de armazenamento de péptidos.

Pureza, COA e como o ler

Cada lote é purificado por HPLC de fase reversa até pelo menos 99%, com confirmação de massa e um certificado associado ao lote. Aplicam-se três verificações. Primeiro, confirmar a massa face a 817,97 g/mol para o hexapéptido amidado; um valor cerca de 1 Da superior indica o ácido livre. Segundo, distingui-lo dos seus congéneres, o que é fácil pela massa e vale a pena fazer: o GHRP-6 tem 873,01 g/mol e a ipamorelin 711,85, pelo que um frasco mal rotulado é imediatamente evidente a partir do certificado. Terceiro, compreender o limite do método: as configurações D nas posições 1, 2 e 5 são isobáricas com as suas homólogas L e não podem ser confirmadas por espectrometria de massa, pelo que a confiança estereoquímica assenta na documentação de síntese, numa resolução cromatográfica limpa ou numa análise quiral dedicada. O nosso guia de leitura de COA explica o que cada secção analítica estabelece.

Estatuto regulamentar

A pralmorelin tem uma aprovação de diagnóstico no Japão como produto farmacêutico utilizado sob supervisão médica. Não tem autorização de introdução no mercado nos Estados Unidos, não é um ingrediente de suplementos alimentares e não é um medicamento manipulado de disponibilidade geral. Uma aprovação de diagnóstico estrangeira não é uma licença para qualquer outra utilização de péptido de grau de investigação.

Péptidos relacionados e leituras adicionais

O GHRP-6 é o composto fundador da classe e o comparador adequado para trabalho relacionado com o apetite; a ipamorelin é o padrão moderno seletivo; a hexarelin é o mais potente e menos seletivo do grupo. No outro braço do eixo, a sermorelin, o Modified GRF 1-29 e a tesamorelin atuam no recetor da GHRH através do AMP cíclico e não do cálcio. O quadro completo está mapeado em «O panorama dos secretagogos da GH explicado».