O que é o sermorelin? Estrutura da GHRH (1-29), mecanismo e panorama da investigação

O sermorelin é a GHRH (1–29) amida sintética: os primeiros 29 resíduos da hormona libertadora da hormona de crescimento humana, de 44 aminoácidos, amidada no terminal C, e o fragmento que décadas de trabalho endócrino demonstraram conter essencialmente toda a informação de ligação ao recetor da hormona completa. Essa truncagem é toda a razão de ser da molécula. Se os resíduos 30 a 44 não contribuem de forma mensurável para a ativação do recetor, então um péptido de 29 resíduos é uma ferramenta mais barata, mais fácil de sintetizar e quimicamente mais tratável para explorar o recetor da GHRH do que a hormona intacta.

Esta página explica a origem da sequência, a forma como atua sobre a hipófise, o que foi publicado e como o material é especificado e manuseado em laboratório. O sermorelin é fornecido sob a forma de pó liofilizado.

Origem e estrutura

A GHRH humana foi isolada em 1982 a partir de tumores pancreáticos de doentes com acromegalia — uma via de descoberta invulgar, possível porque os tumores produziam a hormona hipotalâmica em quantidades que o tecido hipotalâmico nunca produziria. O péptido isolado tinha 44 resíduos. O trabalho de estrutura-atividade que se seguiu estabeleceu que os 29 resíduos N-terminais conservavam toda a potência biológica e que o terminal N, em particular, é essencial: remover sequer o primeiro resíduo faz colapsar a atividade.

O sermorelin é esse fragmento de 29 resíduos com uma amida C-terminal em substituição do carboxilato livre. A amidação é a modificação que mais o distingue de uma truncagem simples; elimina uma carga negativa terminal e melhora a ligação ao recetor, e é uma das características de identidade a confirmar num certificado. O péptido contém uma única metionina na posição 27, que é o resíduo mais vulnerável à oxidação e a razão pela qual a oxidação da metionina surge repetidamente nas discussões sobre a estabilidade dos análogos da GHRH.

Estruturalmente, o sermorelin pertence à superfamília secretina-glucagon, a par do VIP, do PACAP, da secretina e do glucagon. Todos ativam recetores acoplados à proteína G da classe B pelo mesmo mecanismo de dois domínios: a porção C-terminal do péptido acopla-se ao grande domínio extracelular do recetor, e os resíduos N-terminais inserem-se depois no núcleo transmembranar para desencadear a sinalização. Isto explica por que razão a truncagem C-terminal é muito mais bem tolerada do que a truncagem N-terminal.

Como se pensa que o sermorelin atua

O sermorelin liga-se ao recetor da GHRH nos somatotrofos hipofisários. O recetor está acoplado a Gs, aumentando o AMP cíclico e ativando a proteína cinase A, o que aumenta tanto a transcrição do gene da hormona de crescimento como a libertação da hormona armazenada. A exposição sustentada está também associada na literatura à proliferação dos somatotrofos.

A característica que torna o recetor da GHRH útil como alvo de investigação é que a libertação resultante permanece sob controlo fisiológico. O tónus da somatostatina continua a opor-se à secreção, e o retrocontrolo negativo exercido pelo IGF-1 mantém-se intacto. Um agonista da GHRH amplifica, portanto, um ritmo regulado existente em vez de o substituir — ao contrário da administração da própria hormona de crescimento recombinante, que contorna totalmente o eixo. Em modelos animais, isto manifesta-se como pulsatilidade preservada, que é a razão específica pela qual o sermorelin surge em estudos da regulação hipotálamo-hipofisária.

O sermorelin tem também vida curta. A dipeptidil peptidase-4 cliva o péptido a seguir à alanina na posição 2, e a semivida plasmática descrita é de minutos. Isto é uma limitação para alguns desenhos experimentais e uma vantagem para outros: janelas de exposição breves são exatamente o que é necessário para estudar a sinalização pulsátil do recetor, e não a ocupação contínua. Os análogos concebidos para resistir a esta clivagem — o GRF 1-29 modificado, com a sua posição 2 substituída, e o tesamorelin, com o seu grupo acilo N-terminal — existem precisamente por causa dela.

O que a investigação examinou

Fisiologia hipofisária e hipotalâmica

A utilização central é como agonista de referência do recetor da GHRH em trabalho celular e animal: ligação ao recetor, acumulação de AMP cíclico, capacidade de resposta dos somatotrofos e caracterização dos padrões de secreção pulsátil em animais intactos. Neste papel, o sermorelin funciona como padrão e não como objeto de estudo.

Endocrinologia de diagnóstico

O acetato de sermorelin foi anteriormente comercializado como medicamento sujeito a receita médica nos Estados Unidos, utilizado em testes de estimulação da hormona de crescimento e na deficiência de hormona de crescimento pediátrica. Foi retirado do mercado norte-americano em 2008 por razões comerciais e não de segurança. Esses dados clínicos dizem respeito a um medicamento aprovado utilizado sob supervisão médica, e não ao material de grau de investigação.

Trabalho comparativo de estrutura-atividade

O sermorelin é o comparador padrão face ao qual se medem os análogos estabilizados da GHRH, razão pela qual surge constantemente na literatura sobre o tesamorelin e o GRF 1-29 modificado. As comparações diretas são abordadas em tesamorelin vs sermorelin e CJC-1295 vs sermorelin.

Farmacologia de combinação

Um corpo de trabalho distinto examina agonistas do recetor da GHRH em conjunto com agonistas do recetor dos secretagogos da hormona de crescimento, como o ipamorelin, uma vez que os dois recetores atuam sobre a mesma célula através de sistemas de segundos mensageiros diferentes — AMP cíclico e fosfolipase C, respetivamente — e o seu efeito combinado foi descrito como mais do que aditivo em alguns modelos. Existe material de investigação pré-misturado para este desenho.

Formas e formatos que fornecemos

O sermorelin está disponível como pó liofilizado em frascos selados de 2 mg (45 €), 5 mg (75 €) e 10 mg (120 €). A 3357,93 g/mol, um frasco de 5 mg contém aproximadamente 1,49 micromoles — amplamente suficiente para farmacologia de recetores, que opera na gama nanomolar, e consumido muito mais depressa em trabalho com animais. O grupo completo da GHRH encontra-se em análogos da GHRH, com a categoria mais ampla em péptidos de hormona de crescimento e desempenho.

Reconstituição e armazenamento em contexto laboratorial

O cálculo: um frasco de 5 mg reconstituído com 2 mL de água bacteriostática dá 2,5 mg/mL, ou seja, 2500 mcg/mL; 0,1 mL (10 unidades numa seringa U-100) contém 250 mcg. Em termos molares, 2,5 mg/mL de um péptido de 3357,93 g/mol correspondem a aproximadamente 745 micromolar, pelo que um ensaio de recetor a 10 nanomolar exige uma diluição de cerca de 75 000 vezes — feita por etapas, e não num único passo.

Há dois pontos de estabilidade específicos deste péptido. A metionina na posição 27 é sensível à oxidação, pelo que as soluções-mãe são protegidas do ar e da luz. E, em qualquer matriz biológica que contenha DPP-4 ativa, a degradação começa de imediato, o que é uma consideração metodológica e não de armazenamento. Os frascos liofilizados são conservados a −20 °C, protegidos da luz e da humidade; o material reconstituído é dividido em alíquotas e mantido frio. Os pormenores constam do guia de reconstituição e do guia de armazenamento.

Pureza, COA e como o ler

Cada lote é purificado por HPLC de fase reversa até pelo menos 99%, com confirmação da massa e um certificado associado ao lote. Há três verificações importantes neste caso. Primeiro, a amida C-terminal: a massa observada deve corresponder a 3357,93 g/mol, e um valor cerca de 1 Da superior indica o ácido livre em vez da amida. Segundo, a oxidação: um satélite de +16 Da no espectro de massa, ou um ombro de eluição precoce no cromatograma, aponta para metionina oxidada na posição 27. Terceiro, as sequências de deleção: com 29 resíduos, trata-se de uma síntese moderadamente longa, e uma cadeia a que falte um único resíduo pode coeluir muito perto do alvo, pelo que a resolução cromatográfica importa tanto como a percentagem de destaque. O nosso guia de leitura de COA percorre estas verificações em documentos reais.

Estatuto regulamentar

O acetato de sermorelin foi um medicamento sujeito a receita médica aprovado nos Estados Unidos e foi retirado do mercado em 2008; algum sermorelin é preparado por farmácias de manipulação mediante receita médica em certas jurisdições. O péptido de grau de investigação não é um produto farmacêutico e não beneficia de nenhuma das garantias regulamentares associadas.

Péptidos relacionados e leitura adicional

Na família da GHRH, o GRF 1-29 modificado é o análogo curto estabilizado, o CJC-1295 with DAC a versão de ação prolongada com ligação à albumina e o tesamorelin o análogo acilado de comprimento completo. Do lado dos secretagogos, o ipamorelin, o GHRP-2 e o GHRP-6 atuam num recetor totalmente diferente. Todo o panorama é mapeado em o panorama dos secretagogos de GH explicado.