Słownik
NAD+
NAD+ (dinukleotyd nikotynamidoadeninowy) to kofaktor redoks i zużywany substrat sirtuin, PARP i CD38. Co to oznacza w pracy laboratoryjnej.
NAD+ (dinukleotyd nikotynamidoadeninowy, forma utleniona) to niewielki kofaktor dinukleotydowy obecny w każdej komórce. Jako para NAD+/NADH przenosi elektrony w glikolizie, cyklu kwasów trikarboksylowych i fosforylacji oksydacyjnej. Od zwykłego kofaktora katalitycznego odróżnia go to, że NAD+ jest również zużywany: sirtuiny, enzymy PARP i ektoenzym CD38 rozcinają wiązanie glikozydowe, uwalniają nikotynamid i wykorzystują część ADP-rybozową do deacylacji białek, sygnalizacji uszkodzeń DNA lub sygnalizacji wapniowej.
Dlaczego NAD+ ma znaczenie w badaniach peptydów
Ponieważ jest zużywany, a nie jedynie odtwarzany, wewnątrzkomórkowe stężenie NAD+ uważa się za zmienną ograniczającą w modelach metabolicznych i modelach starzenia. Badania na gryzoniach publikowane mniej więcej od 2013 roku opisywały związany z wiekiem spadek tkankowego NAD+ oraz zmiany odczytów zależnych od sirtuin po podaniu prekursorów; dane u ludzi są znacznie skromniejsze i dotyczą głównie biomarkerów, a nie wyników klinicznych. W katalogach NAD+ sąsiaduje zatem ze swoim prekursorem NMN oraz z peptydami pochodzenia mitochondrialnego badanymi pod kątem pokrewnych mitochondrialnych punktów końcowych.
Postępowanie różni się od pracy z peptydem: NAD+ jest higroskopijny i hydrolizuje w wodzie znacznie szybciej niż liofilizowany peptyd, dlatego wodne roztwory robocze w protokołach badawczych przygotowuje się zwykle na bieżąco, przechowuje w niskiej temperaturze i chroni przed zasadowym pH.
Powiązane terminy i materiały
AMPK · senolityk · in vitro. Materiały referencyjne: NAD+ oraz kolekcja NAD+ i glutation. Dalsza lektura: NAD+ a NMN.