Ricostituzione

La ricostituzione è la fase di laboratorio in cui un peptide liofilizzato viene sciolto in un solvente per ottenere una soluzione a concentrazione nota. Il calcolo è una semplice divisione: massa del flaconcino divisa per volume di solvente. Un flaconcino da 5 mg ripreso in 2 mL dà 2.5 mg/mL, ovvero 2,500 mcg/mL; 0.1 mL di quella soluzione contengono quindi 250 mcg di peptide. Si tratta di un calcolo di concentrazione per la manipolazione di materiale di ricerca, non di un'istruzione per la somministrazione all'uomo.

Come si esegue

Il solvente si aggiunge lentamente lungo la parete interna del flaconcino, in modo che scorra sul cake anziché colpirlo a getto; quindi si lascia sciogliere il contenuto o si ruota delicatamente il flaconcino. Un'agitazione vigorosa introduce sollecitazioni di taglio e interfaccia aria-liquido, entrambe in grado di far aggregare le sequenze sensibili. La maggior parte dei peptidi di ricerca liofilizzati si scioglie in pochi minuti; le sequenze idrofobiche possono richiedere una piccola quantità di co-solvente organico prima della diluizione in tampone acquoso.

Perché è importante

Tutto ciò che segue dipende dall'ottenere la concentrazione corretta e dal registrarla. La scelta del solvente determina per quanto tempo la soluzione resta utilizzabile: l'acqua batteriostatica contiene alcol benzilico ed è adatta ai flaconcini a prelievo multiplo, mentre l'acqua sterile non contiene conservanti ed è adatta alle preparazioni monouso. Si etichetti il flaconcino con concentrazione, solvente e data.

Termini correlati

aliquota · stabilità. Si vedano la guida passo passo alla ricostituzione, il calcolatore di ricostituzione e i materiali per la ricostituzione.