Rekonstytucja

Rekonstytucja to etap laboratoryjny polegający na rozpuszczeniu liofilizowanego peptydu w rozpuszczalniku w celu uzyskania roztworu o znanym stężeniu. Obliczenie to proste dzielenie: masa w fiolce podzielona przez objętość rozpuszczalnika. Fiolka 5 mg rozpuszczona w 2 mL daje 2.5 mg/mL, czyli 2500 mcg/mL; 0.1 mL tego roztworu zawiera zatem 250 mcg peptydu. Jest to obliczenie stężenia na potrzeby pracy z materiałem badawczym, a nie instrukcja podawania ludziom.

Jak się ją wykonuje

Rozpuszczalnik dodaje się powoli po wewnętrznej ściance fiolki, tak aby spływał na liofilizat, a nie uderzał w niego strumieniem; następnie fiolkę pozostawia się do rozpuszczenia lub delikatnie obraca. Energiczne wstrząsanie wprowadza naprężenia ścinające i granicę faz powietrze–ciecz, które mogą powodować agregację wrażliwych sekwencji. Większość liofilizowanych peptydów badawczych rozpuszcza się w ciągu kilku minut; sekwencje hydrofobowe mogą wymagać niewielkiej ilości organicznego współrozpuszczalnika przed rozcieńczeniem w buforze wodnym.

Dlaczego to ważne

Wszystkie dalsze etapy zależą od prawidłowego stężenia i jego zapisania. Wybór rozpuszczalnika decyduje o tym, jak długo roztwór nadaje się do użytku: woda bakteriostatyczna zawiera alkohol benzylowy i sprawdza się w fiolkach wielokrotnego pobierania, natomiast woda sterylna nie zawiera środka konserwującego i nadaje się do preparatów jednorazowych. Fiolkę należy opisać stężeniem, rozpuszczalnikiem i datą.

Powiązane terminy

porcja (alikwota) · stabilność. Zob. przewodnik po rekonstytucji krok po kroku, kalkulator rekonstytucji oraz akcesoria do rekonstytucji.