Rekonstituce

Rekonstituce je laboratorní krok, při kterém se lyofilizovaný peptid rozpustí v rozpouštědle za vzniku roztoku o známé koncentraci. Výpočet je prosté dělení: hmotnost v lahvičce dělená objemem rozpouštědla. Lahvička s 5 mg rozpuštěná ve 2 mL dává 2.5 mg/mL, tedy 2,500 mcg/mL; 0.1 mL tohoto roztoku proto obsahuje 250 mcg peptidu. Jde o výpočet koncentrace pro práci s výzkumným materiálem, nikoli o pokyn k podání lidem.

Jak se provádí

Rozpouštědlo se přidává pomalu po vnitřní stěně lahvičky, aby stékalo na lyofilizát, a ne aby do něj tryskalo; lahvička se pak nechá rozpustit nebo se jemně krouživě promíchá. Prudké třepání vnáší smykové síly a rozhraní vzduch–kapalina, což obojí může vést k agregaci citlivých sekvencí. Většina lyofilizovaných výzkumných peptidů se rozpustí během několika minut; hydrofobní sekvence mohou před zředěním do vodného pufru vyžadovat malé množství organického korozpouštědla.

Proč je to důležité

Vše následující závisí na správně stanovené a zaznamenané koncentraci. Volba rozpouštědla určuje, jak dlouho zůstane roztok použitelný: bakteriostatická voda obsahuje benzylalkohol a hodí se pro lahvičky s opakovaným odběrem, zatímco sterilní voda neobsahuje konzervant a hodí se pro jednorázovou přípravu. Označte lahvičku koncentrací, rozpouštědlem a datem.

Související pojmy

alikvot · stabilita. Viz podrobný průvodce rekonstitucí, kalkulačka rekonstituce a potřeby pro rekonstituci.