Reconstitution

La reconstitution est l’étape de laboratoire qui consiste à dissoudre un peptide lyophilisé dans un solvant pour obtenir une solution de concentration connue. Le calcul est une simple division : masse du flacon divisée par le volume de solvant. Un flacon de 5 mg repris dans 2 mL donne 2.5 mg/mL, soit 2,500 mcg/mL ; 0.1 mL de cette solution contient donc 250 mcg de peptide. Il s’agit d’un calcul de concentration destiné à la manipulation de produits de recherche, et non d’une instruction d’administration chez l’humain.

Comment procéder

Le solvant est ajouté lentement le long de la paroi intérieure du flacon, de façon à s’écouler sur le gâteau plutôt qu’à le frapper de plein fouet ; on laisse ensuite le flacon se dissoudre ou on l’agite doucement par rotation. Une agitation vigoureuse introduit du cisaillement et une interface air-liquide, deux facteurs susceptibles de provoquer l’agrégation des séquences sensibles. La plupart des peptides de recherche lyophilisés se dissolvent en quelques minutes ; les séquences hydrophobes peuvent nécessiter une petite quantité de co-solvant organique avant dilution dans un tampon aqueux.

Pourquoi c’est important

Tout ce qui suit dépend d’une concentration correcte et correctement consignée. Le choix du solvant détermine la durée pendant laquelle la solution reste utilisable : l’eau bactériostatique contient de l’alcool benzylique et convient aux flacons à prélèvements multiples, tandis que l’eau stérile ne contient aucun conservateur et convient aux préparations à usage unique. Étiquetez le flacon avec la concentration, le solvant et la date.

Termes associés

aliquote · stabilité. Voir le guide de reconstitution étape par étape, le calculateur de reconstitution et les fournitures de reconstitution.