Rekonstitution

Rekonstitution ist der Laborschritt, bei dem ein lyophilisiertes Peptid in einem Lösungsmittel gelöst wird, um eine Lösung bekannter Konzentration herzustellen. Die Rechnung ist eine einfache Division: Vial-Masse geteilt durch Lösungsmittelvolumen. Ein 5-mg-Vial, aufgenommen in 2 mL, ergibt 2.5 mg/mL, also 2,500 mcg/mL; 0.1 mL dieser Lösung enthalten daher 250 mcg Peptid. Dies ist eine Konzentrationsberechnung für den Umgang mit Forschungsmaterial, keine Anweisung zur Anwendung am Menschen.

So wird sie durchgeführt

Das Lösungsmittel wird langsam an der Innenwand des Vials entlang zugegeben, sodass es auf den Kuchen läuft, statt hineinzuspritzen; anschließend lässt man das Vial stehen, bis sich das Material gelöst hat, oder schwenkt es vorsichtig. Kräftiges Schütteln erzeugt Scherkräfte und Luft-Flüssigkeits-Grenzflächen, die beide empfindliche Sequenzen aggregieren lassen können. Die meisten lyophilisierten Forschungspeptide lösen sich innerhalb von Minuten; hydrophobe Sequenzen benötigen vor der Verdünnung in wässrigen Puffer möglicherweise eine kleine Menge eines organischen Co-Lösungsmittels.

Warum das wichtig ist

Alles Weitere hängt davon ab, die Konzentration richtig zu bestimmen und zu dokumentieren. Die Wahl des Lösungsmittels bestimmt, wie lange die Lösung verwendbar bleibt: Bakteriostatisches Wasser enthält Benzylalkohol und eignet sich für Mehrfachentnahme-Vials, während steriles Wasser kein Konservierungsmittel enthält und sich für Einmalzubereitungen eignet. Beschriften Sie das Vial mit Konzentration, Lösungsmittel und Datum.

Verwandte Begriffe

Aliquot · Stabilität. Siehe den Schritt-für-Schritt-Leitfaden zur Rekonstitution, den Rekonstitutionsrechner und Rekonstitutionsbedarf.