Ricerca sui peptidi cardiovascolari: guida al catalogo di ricerca

La ricerca sui peptidi cardiovascolari è dominata da due sistemi ormonali contrapposti — da un lato gli assi vasocostrittori renina–angiotensina ed endotelina, dall'altro i peptidi natriuretici vasodilatatori — oltre a un insieme crescente di regolatori di derivazione adiposa ed endoteliale. La nostra pagina tematica cardiovascolare raccoglie gli standard peptidici, gli antisieri, i traccianti e i kit immunologici usati in questa letteratura. Questa guida mappa quali famiglie rientrano nel tema, per che cosa viene ordinata ciascuna e quale formato di reagente risponde a quale domanda sperimentale.

Che cosa rientra nel tema cardiovascolare

Una famiglia è classificata qui quando il peptide di origine è prodotto da, o agisce su, cuore, vasi, rene o i circuiti neuroendocrini che controllano pressione e volume ematici. Ciò comprende ormoni circolanti, peptidi paracrini ad azione locale e i biomarcatori usati per fenotipizzare i modelli animali di ipertensione, scompenso cardiaco e danno vascolare. Diverse famiglie sono condivise con altri temi — l'angiopoietina con gli studi sull'angiogenesi tumorale, apelina e adrenomedullina con gli studi metabolici. Ogni articolo è fornito esclusivamente per la ricerca in vitro e su modelli animali approvati; nessuno è un prodotto diagnostico o terapeutico.

Peptidi natriuretici: il nucleo dei biomarcatori

Nessuna famiglia di questo tema viene ordinata più spesso, perché ANP e BNP sono le letture standard del carico cardiaco nei modelli animali:

• ANP — peptide natriuretico atriale, l'ormone di 28 residui rilasciato con lo stiramento atriale; fornito come peptide maturo, come frammenti di proANP e come varianti di specie.
• BNP — peptide natriuretico cerebrale (di tipo B) e il frammento NT-proBNP che domina il lavoro sui biomarcatori, perché il frammento N-terminale scisso è più stabile nel plasma dell'ormone attivo.
• CNP — il peptide di tipo C di derivazione endoteliale che agisce tramite NPR-B, studiato nel tono vascolare e nella crescita ossea più che nella regolazione del volume.
• DNP — il peptide natriuretico di Dendroaspis, uno strumento derivato dal veleno di serpente usato per sondare la farmacologia recettoriale.

Tutti e quattro sono comunemente ordinati insieme ai kit EIA corrispondenti, poiché la domanda quantitativa riguarda di solito la concentrazione plasmatica in un modello.

Famiglie vasocostrittrici e di regolazione pressoria

• Angiotensina — la famiglia più ampia di questo tema: Ang I, Ang II, Ang-(1–7), Ang IV e analoghi selettivi per recettore. La segnalazione Ang-(1–7)/Mas è il ramo in più rapida crescita della letteratura sul sistema renina–angiotensina.
• Endotelina — ET-1, ET-2, ET-3 e i precursori big-endotelina; ET-1 rimane il vasocostrittore endogeno più potente finora caratterizzato e un controllo positivo standard nei saggi di reattività vascolare.
• Urotensina II — un peptide ciclico con attività vasocostrittrice che varia in modo marcato a seconda del distretto vascolare e della specie, motivo per cui qui gli standard specifici per specie contano più che altrove.
• Vasopressina e copeptina — l'ormone antidiuretico e il suo stabile frammento precursore C-terminale; la copeptina si misura al posto della vasopressina proprio perché l'ormone di origine è instabile nel plasma.
• Bradichinina — il braccio vasodilatatore callicreina–chinina, ordinato come nonapeptide, come frammenti des-Arg e come strumenti per i recettori B1/B2.

Regolatori di derivazione endoteliale e adiposa

• Apelina ed ELABELA (Toddler) — i due ligandi endogeni del recettore APJ; le isoforme dell'apelina (apelina-13, apelina-13 piroglutammata, apelina-17, apelina-36) differiscono sostanzialmente per potenza e stabilità, quindi l'isoforma va specificata.
• Adrenomedullina e intermedina (AM2) — vasodilatatori della superfamiglia del CGRP studiati nei modelli di sepsi, scompenso cardiaco e permeabilità vascolare.
• CGRP — peptide correlato al gene della calcitonina; le isoforme α e β più il frammento antagonista CGRP(8–37) supportano sia il lavoro vascolare sia quello neurogeno.
• Urocortina — peptidi della famiglia del CRF con marcati effetti cardioprotettivi riportati nei modelli di ischemia–riperfusione.
• Catestatina, cromogranina A e salusina — peptidi derivati dalla cromogranina e correlati, con attività autonomica e vascolare.
• Adropina ed EC-SOD — reagenti per la funzione endoteliale e lo stress ossidativo, sempre più abbinati alla fenotipizzazione metabolica.
• Ac2-26 — il peptide N-terminale dell'annessina A1, un agonista dei recettori per i peptidi formilati ampiamente usato come controllo pro-risolutivo negli studi sull'infiammazione vascolare.
• PF4 e trombospondina — famiglie di derivazione piastrinica a cavallo tra trombosi e angiogenesi.
• Relaxina — ormone peptidico vasodilatatore e antifibrotico, studiato nei modelli di scompenso cardiaco e di adattamento alla gravidanza.

Quali formati comprende il tema cardiovascolare

Gli standard peptidici sintetici forniscono agonisti, frammenti antagonisti e calibratori per dosaggi immunologici. I peptidi marcati sono qui insolitamente importanti, perché l'autoradiografia recettoriale e il binding di competizione su tessuto vascolare si sono storicamente basati su traccianti all'I-125 di angiotensina II, endotelina-1 e ANP. Gli antisieri policlonali supportano l'immunoistochimica su sezioni di cuore, rene e vasi. I kit EIA e RIA sostengono gran parte del carico quantitativo: le misurazioni plasmatiche di ANP, BNP, endotelina-1 e copeptina nei modelli murini sono di routine. Il lavoro di pull-down e cattura recettoriale utilizza biglie magnetiche.

Come i laboratori scelgono all'interno di una famiglia

Tre decisioni ricorrenti. Isoforma e stato di processamento: BNP rispetto a NT-proBNP, apelina-13 rispetto ad apelina-36, big-ET rispetto a ET-1 matura — sono analiti diversi, e un saggio calibrato per uno non restituirà correttamente l'altro. Specie: le sequenze dei peptidi natriuretici di roditore e umane divergono abbastanza da far sì che un kit calibrato sull'uomo sottostimi i campioni murini; ogni articolo del catalogo indica la propria reattività di specie. Frammento agonista o antagonista: CGRP(8–37), gli analoghi des-Arg della bradichinina e Ang-(1–7) sono strumenti recettoriali, non sostituti del peptide di origine nella quantificazione. Per le domande sulla concentrazione nei campioni, un kit è quasi sempre più rapido dell'assemblaggio di anticorpo, tracciante e standard.

Note di manipolazione per questo tema

Due proprietà dominano la manipolazione pratica. Diversi peptidi cardiovascolari sono ciclizzati tramite ponti disolfuro — l'endotelina-1 porta due ponti disolfuro, ANP e urotensina II uno ciascuno — e condizioni riducenti o tamponi contenenti tioli ne distruggono l'attività. Altri vengono degradati rapidamente nel plasma, motivo per cui frammenti precursori stabili come NT-proBNP e copeptina sono diventati gli analiti preferiti; la raccolta dei campioni con inibitori delle proteasi conta quanto la scelta del reagente. Per il resto si applica il flusso di lavoro standard: flaconcini liofilizzati sigillati a −20 °C, aliquote monouso dopo la ricostituzione, nessun ciclo ripetuto di congelamento–scongelamento. Si vedano la guida alla conservazione, la guida all'aliquotazione e la guida al COA per la verifica del contenuto peptidico.

Dove proseguire

Consulti l'intero tema cardiovascolare, l'hub su cuore e vasi o l'hub sul sistema dei peptidi natriuretici. Guide correlate trattano la sezione diabete e metabolismo, che condivide apelina e adrenomedullina, e la sezione sul cancro per le famiglie dell'angiogenesi.