Marcatura radioattiva con I-125

L'I-125 (iodio-125) è un radionuclide emettitore gamma con un'emivita di circa 59.4 giorni, incorporato nei peptidi mediante sostituzione elettrofila sull'anello fenolico della tirosina oppure, in assenza di tirosina, sull'istidina o tramite un reagente di Bolton-Hunter coniugato. Cloramina-T e Iodogen sono i metodi ossidativi standard.

Perché è ancora utilizzato

Il motivo è l'attività specifica. Un peptide monoiodato può avvicinarsi a 2,200 Ci/mmol, il che consente di condurre studi di legame recettoriale e RIA a vere concentrazioni traccianti, che non perturbano l'equilibrio misurato. Gli studi di saturazione, competizione e cinetica di legame sono stati costruiti su traccianti con I-125, e buona parte della letteratura sull'affinità recettoriale degli ormoni peptidici si basa su di essi.

Vincoli pratici

Ogni aspetto del formato è governato dal decadimento. L'attività è riportata con una data di riferimento e deve essere corretta per il decadimento; un tracciante è in genere utilizzabile per una o due emivite, prima che l'attività specifica e il danno radiolitico lo rendano inaffidabile. L'impiego richiede un'autorizzazione per materiali radioattivi, un contatore gamma, una manipolazione schermata e un percorso di smaltimento dei rifiuti. La radiolisi degrada anche il peptide stesso, per cui i traccianti si conservano diluiti, spesso con un captatore di radicali, e vengono ripurificati prima di impieghi esigenti. I peptidi privi di tirosina possono richiedere una modifica della sequenza, da validare rispetto al peptide originario.

Termini e materiali correlati

marcatura con biotina · marcatura FAM/FITC · emivita. Materiale di riferimento: peptidi marcati, kit di dosaggio. Approfondimenti: guida ai peptidi marcati.