In vitro

In vitro betekent "in glas": experimenten die buiten een levend organisme worden uitgevoerd. De categorie omvat celvrij werk zoals receptorbinding, enzymkinetiek en oppervlakteplasmonresonantie, en celgebaseerd werk zoals monolaagkweek, primaire cellen, organoïden en weefselexplantaten.

Wat in-vitrogegevens wel en niet kunnen onderbouwen

De sterke punten zijn controle en resolutie. De concentratie bij het doelwit is bekend in plaats van afgeleid, verstorende factoren zijn verwijderd en het mechanisme kan worden geïsoleerd — daarom worden bindingsaffiniteiten, EC50-waarden en selectiviteitsprofielen op deze manier bepaald. Juist die precisie maakt overmatige extrapolatie verleidelijk.

De standaardbeperkingen verdienen het om te worden benoemd. Concentraties in kweek overschrijden vaak alles wat in een volledig organisme haalbaar is, zodat een micromolair celresultaat bij haalbare blootstelling irrelevant kan zijn. Niets in een kweekschaal bootst absorptie, binding aan plasma-eiwitten, levermetabolisme, renale klaring of immuunrespons na — een peptide met een plasmahalfwaardetijd van twee minuten kan in serumvrij medium onbeperkt stabiel lijken. Geïmmortaliseerde cellijnen drijven genetisch af en worden vaak verkeerd geïdentificeerd. En de stabiliteit van peptiden in kweekmedium is zelf een variabele die de meeste protocollen onvoldoende rapporteren.

Een in-vitrobevinding onderbouwt daarom een mechanistische hypothese. Pas de overstap naar in-vivowerk toetst of die het contact met een organisme overleeft.

Gerelateerde termen en materiaal

preklinisch · ELISA. Referentiemateriaal: assaykits, peptidebibliotheken. Verder lezen: pH en oplosbaarheid van peptiden.