In vitro

In vitro significa "nel vetro": sperimentazione condotta al di fuori di un organismo vivente. La categoria comprende il lavoro senza cellule, come legame recettoriale, cinetica enzimatica e risonanza plasmonica di superficie, e il lavoro su cellule, come colture in monostrato, cellule primarie, organoidi ed espianti tissutali.

Cosa possono e non possono sostenere i dati in vitro

I suoi punti di forza sono controllo e risoluzione. La concentrazione al bersaglio è nota anziché dedotta, i fattori confondenti sono eliminati e il meccanismo può essere isolato: per questo affinità di legame, valori di EC50 e profili di selettività sono generati in questo modo. Proprio questa precisione rende allettante l'estrapolazione eccessiva.

Vale la pena elencare i limiti standard. Le concentrazioni usate in coltura superano spesso qualsiasi livello raggiungibile in un organismo intero, per cui un risultato cellulare micromolare può essere irrilevante alle esposizioni ottenibili. Nulla in una piastra riproduce assorbimento, legame alle proteine plasmatiche, metabolismo epatico, clearance renale o risposta immunitaria: un peptide con un'emivita plasmatica di due minuti può apparire stabile a tempo indefinito in un terreno privo di siero. Le linee immortalizzate subiscono deriva genetica e sono spesso identificate in modo errato. E la stabilità del peptide nel terreno di coltura è essa stessa una variabile che la maggior parte dei protocolli riporta in modo insufficiente.

Un risultato in vitro sostiene quindi un'ipotesi meccanicistica. È il passaggio al lavoro in vivo a verificare se regge al contatto con un organismo.

Termini e materiali correlati

preclinico · ELISA. Materiale di riferimento: kit di dosaggio, librerie di peptidi. Approfondimenti: pH e solubilità dei peptidi.