Glossário
In vitro
In vitro significa fora de um organismo vivo: cultura celular, ligação a recetores, ensaios enzimáticos. O que esses dados podem e não podem suportar.
In vitro significa "em vidro": experimentação realizada fora de um organismo vivo. A categoria abrange trabalho acelular, como ligação a recetores, cinética enzimática e ressonância plasmónica de superfície, e trabalho celular, como cultura em monocamada, células primárias, organoides e explantes de tecido.
O que os dados in vitro podem e não podem suportar
Os seus pontos fortes são o controlo e a resolução. A concentração no alvo é conhecida em vez de inferida, os fatores de confusão são eliminados e o mecanismo pode ser isolado — razão pela qual as afinidades de ligação, os valores de EC50 e os perfis de seletividade são gerados desta forma. É precisamente essa precisão que torna tentadora a extrapolação excessiva.
Vale a pena nomear as limitações habituais. As concentrações utilizadas em cultura excedem frequentemente tudo o que é alcançável num organismo completo, pelo que um resultado celular micromolar pode ser irrelevante nas exposições atingíveis. Nada numa placa reproduz a absorção, a ligação às proteínas plasmáticas, o metabolismo hepático, a depuração renal ou a resposta imunitária — um péptido com uma semivida plasmática de dois minutos pode parecer indefinidamente estável em meio sem soro. As linhas imortalizadas sofrem deriva genética e são frequentemente mal identificadas. E a estabilidade do péptido no meio de cultura é, ela própria, uma variável que a maioria dos protocolos reporta de forma insuficiente.
Um resultado in vitro suporta, portanto, uma hipótese mecanística. A progressão para trabalho in vivo é o que testa se essa hipótese resiste ao contacto com um organismo.
Termos e material relacionados
pré-clínico · ELISA. Material de referência: kits de ensaio, bibliotecas de péptidos. Leitura complementar: pH e solubilidade dos péptidos.