In vitro

In vitro significa "en vidrio": experimentación realizada fuera de un organismo vivo. La categoría abarca el trabajo acelular, como la unión a receptores, la cinética enzimática y la resonancia de plasmón superficial, y el trabajo celular, como el cultivo en monocapa, las células primarias, los organoides y los explantes tisulares.

Qué pueden y qué no pueden respaldar los datos in vitro

Sus puntos fuertes son el control y la resolución. La concentración en la diana se conoce en lugar de deducirse, se eliminan los factores de confusión y puede aislarse el mecanismo; por eso las afinidades de unión, los valores de CE50 y los perfiles de selectividad se generan de este modo. Esa precisión es justamente lo que hace tentadora la extrapolación excesiva.

Conviene señalar las limitaciones habituales. Las concentraciones empleadas en cultivo superan con frecuencia cualquier valor alcanzable en un organismo completo, de modo que un resultado celular en el intervalo micromolar puede ser irrelevante a las exposiciones alcanzables. Nada en una placa reproduce la absorción, la unión a proteínas plasmáticas, el metabolismo hepático, el aclaramiento renal ni la respuesta inmunitaria: un péptido con una semivida plasmática de dos minutos puede parecer estable indefinidamente en un medio sin suero. Las líneas inmortalizadas derivan genéticamente y a menudo están mal identificadas. Y la estabilidad del péptido en el medio de cultivo es en sí misma una variable que la mayoría de los protocolos no documenta suficientemente.

Por tanto, un hallazgo in vitro respalda una hipótesis mecanística. El paso al trabajo in vivo es lo que pone a prueba si resiste el contacto con un organismo.

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preclínico · ELISA. Material de referencia: kits de ensayo, bibliotecas de péptidos. Lectura adicional: pH y solubilidad de los péptidos.