Woordenlijst
RIA (radio-immunoassay)
RIA is een competitieve immunoassay met een I-125-tracer, ontwikkeld door Yalow en Berson. Hoe het werkt en waarom het voor kleine peptiden blijft bestaan.
RIA (radio-immunoassay) is een competitieve immunoassay waarbij een radioactief gelabeld tracerantigeen — vrijwel altijd een met I-125 gelabeld peptide — met niet-gelabelde analyt in het monster concurreert om een beperkte hoeveelheid antilichaam. Gebonden en vrije fracties worden gescheiden en de gebonden radioactiviteit wordt in een gammateller geteld. Het signaal daalt naarmate de analytconcentratie stijgt, dus de standaardcurve is omgekeerd.
Waarom het nog bestaat
RIA werd door Rosalyn Yalow en Solomon Berson ontwikkeld voor het meten van insuline en leverde Yalow een deel van de Nobelprijs van 1977 op; het was de eerste assay die gevoelig genoeg was om circulerende hormonen te kwantificeren. ELISA heeft het in de meeste laboratoria verdrongen, omdat het vergunningen voor radioactiviteit, afvalbehandeling en de halfwaardetijd van ongeveer 60 dagen van I-125 vermijdt. RIA blijft bestaan waar het nog wint: zeer kleine peptiden en steroïden waarbij gevoeligheid in het lage picogrambereik belangrijk is, en matrices waarin enzymatische of gekleurde interfererende stoffen een optische uitlezing verstoren.
De praktische beperkingen zijn evenzeer regelgevend als technisch — een vergunning voor radioactieve stoffen, specifieke telapparatuur, een tracer die volgens een vast schema vervalt en verwijderingsverplichtingen. Die kosten, niet de prestaties van de assay, bepalen meestal de keuze.
Gerelateerde termen en materiaal
immunogeen · antiserum · soortreactiviteit. Referentiemateriaal: assaykits, gelabelde peptiden. Verder lezen: hoe ELISA- en RIA-kits peptiden kwantificeren.