Antiserum

Antiserum is het volledige serum dat na immunisatie van een dier wordt verzameld: het bloed laat men stollen, cellen en fibrine worden verwijderd, en wat overblijft is de vloeibare fractie. Cruciaal is dat het de antilichamen bevat die tegen uw immunogeen zijn opgewekt en het volledige reeds bestaande immunoglobulinerepertoire van het dier, plus albumine, complementcomponenten en serumproteasen.

Waarom het formaat ertoe doet

Doelwitspecifiek antilichaam is in een antiserum doorgaans slechts enkele procenten van het totale IgG. Voor toepassingen waarin overtollig irrelevant eiwit geen kwaad kan — veel ELISA- en dot-blottoepassingen, of immunohistochemie bij hoge verdunning — is antiserum de goedkoopste en meest aviede optie, en het hoge totale eiwitgehalte fungeert zelfs als eigen drager. Voor alles wat conjugatie, lage achtergrond of een gedefinieerde eiwitconcentratie vereist, is het extra materiaal een nadeel: labelingschemie modificeert al het IgG zonder onderscheid, en niet-specifieke serumbinding verhoogt de achtergrond.

De titer van een antiserum wordt uitgedrukt als de werkverdunning die een aanvaardbaar signaal geeft, niet als mg/mL specifiek antilichaam, omdat de specifieke concentratie doorgaans onbekend is. Natriumazide of glycerol is normaal gesproken als conserveermiddel aanwezig; dat is onverenigbaar met HRP-conjugaten en moet vóór gebruik worden gecontroleerd.

Gerelateerde termen en materiaal

gezuiverd IgG · polyklonaal versus monoklonaal · soortreactiviteit. Referentiemateriaal: catalogus antilichamen. Verder lezen: antiserum versus gezuiverd IgG.