Glosář
RIA (radioimunoanalýza)
RIA je kompetitivní imunoanalýza se stopovačem I-125, kterou vyvinuli Yalowová a Berson. Jak funguje a proč přetrvává u malých peptidů.
RIA (radioimunoanalýza) je kompetitivní imunoanalýza, v níž radioaktivně značený stopovací antigen — téměř vždy peptid značený I-125 — soutěží s neznačeným analytem ve vzorku o omezené množství protilátky. Vázaná a volná frakce se oddělí a radioaktivita vázané frakce se měří gama čítačem. Signál klesá s rostoucí koncentrací analytu, takže standardní křivka je inverzní.
Proč stále existuje
RIA vyvinuli Rosalyn Yalowová a Solomon Berson pro měření inzulinu a Yalowové vynesla podíl na Nobelově ceně za rok 1977; byla to první metoda dostatečně citlivá ke kvantifikaci cirkulujících hormonů. Ve většině laboratoří ji vytlačila ELISA, protože nevyžaduje povolení pro práci s radioaktivními látkami, nakládání s radioaktivním odpadem a nepodléhá přibližně 60dennímu poločasu rozpadu I-125. RIA přetrvává tam, kde stále vítězí: u velmi malých peptidů a steroidů, u nichž záleží na citlivosti v řádu nízkých pikogramů, a v matricích, kde enzymatické nebo barevné interferenty narušují optické odečítání.
Praktická omezení jsou stejně tak regulační jako technická — povolení pro radioaktivní materiály, specializované měřicí vybavení, stopovač rozpadající se podle pevného harmonogramu a povinnosti spojené s likvidací. O volbě obvykle rozhodují tyto náklady, nikoli výkonnost metody.
Související pojmy a materiály
imunogen · antisérum · druhová reaktivita. Referenční materiál: soupravy pro stanovení, značené peptidy. Další četba: jak soupravy ELISA a RIA kvantifikují peptidy.