Słownik
RIA (test radioimmunologiczny)
RIA to kompetycyjny test immunologiczny ze znacznikiem I-125, opracowany przez Yalow i Bersona. Jak działa i dlaczego przetrwał w oznaczeniach małych peptydów.
RIA (test radioimmunologiczny) to kompetycyjny test immunologiczny, w którym znakowany radioaktywnie antygen-znacznik — niemal zawsze peptyd znakowany I-125 — konkuruje z nieznakowanym analitem z próbki o ograniczoną ilość przeciwciała. Frakcje związaną i wolną rozdziela się, a radioaktywność frakcji związanej mierzy się licznikiem gamma. Sygnał maleje wraz ze wzrostem stężenia analitu, więc krzywa wzorcowa ma przebieg odwrotny.
Dlaczego wciąż istnieje
RIA opracowali Rosalyn Yalow i Solomon Berson do pomiaru insuliny, co przyniosło Yalow udział w Nagrodzie Nobla w 1977 roku; był to pierwszy test na tyle czuły, by oznaczać ilościowo krążące hormony. ELISA wyparła go w większości laboratoriów, ponieważ nie wymaga zezwoleń na materiały promieniotwórcze, gospodarki odpadami ani nie podlega ograniczeniu wynikającemu z około 60-dniowego okresu półtrwania I-125. RIA utrzymuje się tam, gdzie nadal wygrywa: w przypadku bardzo małych peptydów i steroidów, gdy liczy się czułość w zakresie niskich pikogramów, oraz w matrycach, w których interferenty enzymatyczne lub barwne zaburzają odczyt optyczny.
Ograniczenia praktyczne są w równym stopniu regulacyjne, co techniczne — zezwolenie na materiały promieniotwórcze, dedykowany sprzęt pomiarowy, znacznik rozpadający się według stałego harmonogramu i obowiązki związane z utylizacją. O wyborze zwykle decydują te koszty, a nie parametry testu.
Powiązane terminy i materiały
immunogen · antysurowica · reaktywność gatunkowa. Materiały referencyjne: zestawy do oznaczeń, peptydy znakowane. Dalsza lektura: jak zestawy ELISA i RIA oznaczają ilościowo peptydy.