Glossar
RIA (Radioimmunassay)
RIA ist ein kompetitiver Immunassay mit I-125-Tracer, entwickelt von Yalow und Berson. Wie er funktioniert und warum er für kleine Peptide fortbesteht.
RIA (Radioimmunassay) ist ein kompetitiver Immunassay, bei dem ein radioaktiv markiertes Tracer-Antigen — fast immer ein I-125-markiertes Peptid — mit unmarkiertem Analyten der Probe um eine begrenzte Menge Antikörper konkurriert. Gebundene und freie Fraktion werden getrennt, und die gebundene Radioaktivität wird in einem Gammazähler gemessen. Das Signal sinkt mit steigender Analytkonzentration, sodass die Standardkurve invers verläuft.
Warum es ihn noch gibt
Der RIA wurde von Rosalyn Yalow und Solomon Berson zur Insulinmessung entwickelt und brachte Yalow einen Anteil am Nobelpreis 1977 ein; er war der erste Assay, der empfindlich genug war, um zirkulierende Hormone zu quantifizieren. Der ELISA hat ihn in den meisten Laboren verdrängt, weil er ohne Genehmigung für radioaktive Stoffe, ohne Abfallentsorgung und ohne die Halbwertszeit von rund 60 Tagen von I-125 auskommt. Der RIA hält sich dort, wo er weiterhin überlegen ist: bei sehr kleinen Peptiden und Steroiden, wo eine Empfindlichkeit im niedrigen Pikogrammbereich zählt, und bei Matrices, in denen enzymatische oder farbige Störsubstanzen eine optische Auslesung beeinträchtigen.
Die praktischen Einschränkungen sind ebenso regulatorischer wie technischer Natur — eine Genehmigung für radioaktive Stoffe, eigene Messgeräte, ein Tracer, der nach festem Zeitplan zerfällt, und Entsorgungspflichten. Meist entscheiden diese Kosten und nicht die Assayleistung über die Wahl.
Verwandte Begriffe und Materialien
Immunogen · Antiserum · Speziesreaktivität. Referenzmaterial: Assay-Kits, markierte Peptide. Weiterführende Lektüre: wie ELISA- und RIA-Kits Peptide quantifizieren.