I-125-radiolabel

I-125 (jodium-125) is een gammastralend radionuclide met een halfwaardetijd van ongeveer 59,4 dagen dat in peptiden wordt ingebouwd via elektrofiele substitutie op de fenolring van tyrosine — of, als er geen tyrosine aanwezig is, op histidine of via een geconjugeerd Bolton-Hunter-reagens. Chloramine-T en Iodogen zijn de standaardmethoden voor oxidatie.

Waarom het nog steeds wordt gebruikt

De specifieke activiteit is de reden. Een mono-gejodeerd peptide kan ongeveer 2.200 Ci/mmol bereiken, waardoor receptorbinding en RIA-werk kunnen plaatsvinden bij echte tracerconcentraties die het te meten evenwicht niet verstoren. Verzadigings-, competitie- en kinetische bindingsstudies zijn gebouwd op I-125-tracers, en een groot deel van de literatuur over receptoraffiniteit voor peptidehormonen berust erop.

Praktische beperkingen

Alles aan dit formaat wordt bepaald door verval. De activiteit wordt vermeld met een referentiedatum en moet voor verval worden gecorrigeerd; een tracer is doorgaans één tot twee halfwaardetijden bruikbaar voordat de specifieke activiteit en radiolytische schade hem onbetrouwbaar maken. Gebruik vereist een vergunning voor radioactieve stoffen, een gammateller, afgeschermde hantering en een afvoerroute voor afval. Radiolyse breekt ook het peptide zelf af, dus tracers worden verdund bewaard, vaak met een radicalenvanger, en vóór veeleisend werk opnieuw gezuiverd. Peptiden zonder tyrosine hebben soms een sequentiemodificatie nodig, die tegen het moedermolecuul moet worden gevalideerd.

Gerelateerde termen en materiaal

biotinelabel · FAM/FITC-label · halfwaardetijd. Referentiemateriaal: gelabelde peptiden, assaykits. Verder lezen: gids over gelabelde peptiden.