Marcação radioativa com I-125

O I-125 (iodo-125) é um radionuclídeo emissor gama com uma semivida de cerca de 59,4 dias, incorporado nos péptidos por substituição eletrofílica no anel fenólico da tirosina — ou, na ausência de tirosina, na histidina ou através de um reagente de Bolton-Hunter conjugado. A cloramina-T e o Iodogen são os métodos oxidantes padrão.

Porque continua a ser utilizado

A razão é a atividade específica. Um péptido monoiodado pode aproximar-se de 2200 Ci/mmol, o que permite realizar ensaios de ligação a recetores e RIA em verdadeiras concentrações de traçador, que não perturbam o equilíbrio medido. Os estudos de saturação, competição e cinética de ligação foram construídos sobre traçadores de I-125, e grande parte da literatura sobre a afinidade dos recetores das hormonas peptídicas assenta neles.

Limitações práticas

Tudo neste formato é determinado pelo decaimento. A atividade é indicada com uma data de referência e tem de ser corrigida para o decaimento; um traçador é normalmente utilizável durante uma a duas semividas, antes que a atividade específica e o dano radiolítico o tornem pouco fiável. A sua utilização exige uma licença para materiais radioativos, um contador gama, manuseamento com blindagem e um circuito de resíduos. A radiólise degrada também o próprio péptido, pelo que os traçadores são conservados diluídos, muitas vezes com um sequestrador de radicais, e repurificados antes de trabalhos exigentes. Os péptidos sem tirosina podem necessitar de uma modificação de sequência, que tem de ser validada face ao péptido original.

Termos e material relacionados

marcação com biotina · marcação FAM/FITC · semivida. Material de referência: péptidos marcados, kits de ensaio. Leitura complementar: guia de péptidos marcados.