I-125-Radiomarkierung

I-125 (Iod-125) ist ein gammastrahlendes Radionuklid mit einer Halbwertszeit von etwa 59.4 Tagen, das durch elektrophile Substitution am Phenolring von Tyrosin in Peptide eingebaut wird — oder, wenn kein Tyrosin vorhanden ist, an Histidin oder über ein konjugiertes Bolton-Hunter-Reagenz. Chloramin-T und Iodogen sind die Standard-Oxidationsmethoden.

Warum es immer noch eingesetzt wird

Der Grund ist die spezifische Aktivität. Ein monoiodiertes Peptid kann an 2,200 Ci/mmol heranreichen, wodurch Rezeptorbindungs- und RIA-Arbeiten bei echten Tracer-Konzentrationen ablaufen können, die das gemessene Gleichgewicht nicht stören. Sättigungs-, Kompetitions- und kinetische Bindungsstudien wurden auf I-125-Tracern aufgebaut, und ein Großteil der Literatur zur Rezeptoraffinität von Peptidhormonen beruht darauf.

Praktische Einschränkungen

Alles an diesem Format wird vom Zerfall bestimmt. Die Aktivität wird mit einem Referenzdatum angegeben und muss zerfallskorrigiert werden; ein Tracer ist typischerweise ein bis zwei Halbwertszeiten lang verwendbar, bevor spezifische Aktivität und radiolytische Schäden ihn unzuverlässig machen. Die Verwendung erfordert eine Genehmigung für radioaktive Stoffe, einen Gammazähler, abgeschirmte Handhabung und einen Entsorgungsweg. Radiolyse schädigt auch das Peptid selbst, daher werden Tracer verdünnt gelagert, oft mit einem Radikalfänger, und vor anspruchsvollen Arbeiten nachgereinigt. Peptide ohne Tyrosin benötigen möglicherweise eine Sequenzmodifikation, die gegen das Ausgangspeptid validiert werden muss.

Verwandte Begriffe und Materialien

Biotin-Markierung · FAM/FITC-Markierung · Halbwertszeit. Referenzmaterial: markierte Peptide, Assay-Kits. Weiterführende Lektüre: Leitfaden zu markierten Peptiden.