Radiomarquage à l’I-125

L’I-125 (iode 125) est un radionucléide émetteur gamma d’une demi-vie d’environ 59.4 jours, incorporé aux peptides par substitution électrophile sur le noyau phénol de la tyrosine — ou, en l’absence de tyrosine, sur l’histidine ou via un réactif de Bolton-Hunter conjugué. La chloramine T et l’Iodogen sont les méthodes d’oxydation de référence.

Pourquoi on l’utilise encore

L’activité spécifique en est la raison. Un peptide mono-iodé peut approcher 2,200 Ci/mmol, ce qui permet de mener les études de liaison aux récepteurs et la RIA à de véritables concentrations traceuses, qui ne perturbent pas l’équilibre mesuré. Les études de saturation, de compétition et de cinétique de liaison se sont construites sur des traceurs à l’I-125, et une grande partie de la littérature sur l’affinité des hormones peptidiques pour leurs récepteurs repose sur eux.

Contraintes pratiques

Tout, dans ce format, est régi par la décroissance radioactive. L’activité est indiquée avec une date de référence et doit être corrigée de la décroissance ; un traceur reste généralement utilisable pendant une à deux demi-vies, après quoi la baisse d’activité spécifique et les dommages radiolytiques le rendent peu fiable. Son utilisation exige une autorisation de détention de substances radioactives, un compteur gamma, une manipulation sous protection et une filière d’élimination des déchets. La radiolyse dégrade aussi le peptide lui-même : les traceurs sont donc conservés dilués, souvent avec un piégeur de radicaux, et repurifiés avant les travaux exigeants. Les peptides dépourvus de tyrosine peuvent nécessiter une modification de séquence, qui doit être validée par rapport au peptide parent.

Termes et produits associés

Marquage à la biotine · marquage FAM/FITC · demi-vie. Produits de référence : peptides marqués, kits de dosage. Pour aller plus loin : guide des peptides marqués.