Antiser

Antiserul este serul integral recoltat de la un animal după imunizare: sângele este lăsat să se coaguleze, celulele și fibrina sunt îndepărtate, iar ceea ce rămâne este fracția lichidă. În mod esențial, acesta conține anticorpii produși împotriva imunogenului dumneavoastră și întregul repertoriu preexistent de imunoglobuline al animalului, plus albumină, componente ale complementului și proteaze serice.

De ce contează formatul

Anticorpul specific țintei reprezintă de regulă doar câteva procente din IgG totale dintr-un antiser. Pentru aplicațiile în care excesul de proteine irelevante este inofensiv — multe utilizări ELISA și dot-blot sau imunohistochimia la diluție mare — antiserul este opțiunea cea mai ieftină și cu cea mai mare aviditate, iar conținutul său ridicat de proteine totale acționează chiar ca propriul purtător. Pentru orice aplicație care necesită conjugare, fond redus sau o concentrație proteică definită, materialul suplimentar devine un dezavantaj: chimia de marcare va modifica fără discriminare toate IgG, iar legarea nespecifică a serului crește fondul.

Titrul unui antiser se exprimă ca diluția de lucru care oferă un semnal acceptabil, nu în mg/mL de anticorp specific, deoarece concentrația specifică este în general necunoscută. Azida de sodiu sau glicerolul sunt de obicei prezente drept conservant, ceea ce este incompatibil cu conjugații HRP și trebuie verificat înainte de utilizare.

Termeni și materiale înrudite

IgG purificat · policlonal vs monoclonal · reactivitate de specie. Material de referință: catalogul de anticorpi. Lectură suplimentară: antiser vs IgG purificat.