Anticorp (policlonal vs monoclonal)

Un anticorp este o imunoglobulină care se leagă de o caracteristică moleculară specifică — un epitop. Distincția policlonal/monoclonal descrie modul în care a fost produs reactivul și determină aproape fiecare decizie practică în lucrările de detecție a peptidelor.

Compromisul

Anticorpii policlonali sunt populația heterogenă recoltată de la o gazdă imunizată, de regulă iepure, capră sau oaie, după imunizarea cu un imunogen. Deoarece răspund multe linii de celule B, amestecul recunoaște simultan mai mulți epitopi. Aceasta oferă aviditate ridicată, toleranță la denaturare sau modificare parțială și semnal puternic — cu prețul variabilității de la un lot la altul și al unei cantități limitate, legate de o singură recoltare de sânge de la un animal.

Anticorpii monoclonali provin dintr-o singură clonă de celule B imortalizată ca hibridom (sau sunt exprimați recombinant din secvențe clonate), astfel încât fiecare moleculă este identică și se leagă de un singur epitop. Sunt regenerabili și reproductibili pe termen nelimitat, însă o singură mutație punctiformă, un situs de modificare blocat sau o etapă de denaturare din protocolul dumneavoastră pot aboli complet legarea.

Regulă practică pentru peptidele scurte: anticorpi policlonali pentru captură și imunoprecipitare, unde aviditatea ajută, și monoclonali oriunde trebuie exclusă reactivitatea încrucișată între analogi apropiați. Perechile pentru ELISA de tip sandwich combină frecvent câte unul din fiecare.

Termeni și materiale înrudite

antiser · IgG purificat · reactivitate de specie · peptidă de blocare. Material de referință: catalogul de anticorpi. Lectură suplimentară: anticorpii în cercetarea peptidelor.