Słownik
Antysurowica
Antysurowica to pełna surowica immunizowanego zwierzęcia: przeciwciała docelowe oraz całe pozostałe IgG i białka surowicy. Co to oznacza dla miana i tła.
Antysurowica to pełna surowica pobrana od zwierzęcia po immunizacji: krew pozostawia się do skrzepnięcia, usuwa komórki i fibrynę, a pozostałość stanowi frakcja płynna. Co kluczowe, zawiera ona przeciwciała wytworzone przeciwko danemu immunogenowi oraz cały wcześniej istniejący repertuar immunoglobulin zwierzęcia, a także albuminę, składniki dopełniacza i proteazy surowicy.
Dlaczego forma ma znaczenie
Przeciwciała swoiste wobec celu stanowią w antysurowicy zwykle zaledwie kilka procent całkowitego IgG. W zastosowaniach, w których nadmiar nieistotnego białka nie szkodzi — w wielu testach ELISA i dot-blot czy w immunohistochemii przy dużym rozcieńczeniu — antysurowica jest najtańszą opcją o największej awidności, a wysoka zawartość białka całkowitego działa wręcz jak własny nośnik. W zastosowaniach wymagających koniugacji, niskiego tła lub określonego stężenia białka dodatkowy materiał staje się obciążeniem: chemia znakowania zmodyfikuje bez wyboru całe IgG, a niespecyficzne wiązanie składników surowicy podnosi tło.
Miano antysurowicy wyraża się jako rozcieńczenie robocze dające akceptowalny sygnał, a nie w mg/mL przeciwciała swoistego, ponieważ stężenie swoiste jest zazwyczaj nieznane. Jako konserwant zwykle obecny jest azydek sodu lub glicerol; azydek jest niezgodny z koniugatami HRP, co należy sprawdzić przed użyciem.
Powiązane terminy i materiały
oczyszczone IgG · poliklonalne a monoklonalne · reaktywność gatunkowa. Materiały referencyjne: katalog przeciwciał. Dalsza lektura: antysurowica a oczyszczone IgG.