Antisérum

L’antisérum est le sérum total recueilli sur un animal après immunisation : on laisse le sang coaguler, on élimine les cellules et la fibrine, et il reste la fraction liquide. Point essentiel, il contient les anticorps dirigés contre votre immunogène ainsi que tout le répertoire d’immunoglobulines préexistant de l’animal, plus l’albumine, les composants du complément et les protéases sériques.

Pourquoi le format compte

L’anticorps spécifique de la cible ne représente généralement que quelques pour cent des IgG totales d’un antisérum. Pour les applications où un excès de protéines non pertinentes est sans conséquence — nombreux usages en ELISA et dot-blot, ou immunohistochimie à forte dilution —, l’antisérum est l’option la moins chère et la plus avide, et sa teneur élevée en protéines totales sert même de support. Pour tout ce qui exige une conjugaison, un faible bruit de fond ou une concentration protéique définie, cette matière supplémentaire devient un handicap : la chimie de marquage modifie toutes les IgG sans distinction, et la liaison sérique non spécifique élève le bruit de fond.

Le titre d’un antisérum s’exprime comme la dilution de travail donnant un signal acceptable, et non en mg/mL d’anticorps spécifique, car la concentration spécifique est généralement inconnue. De l’azoture de sodium ou du glycérol est normalement présent comme conservateur ; l’azoture est incompatible avec les conjugués HRP et doit être vérifié avant utilisation.

Termes et matériels associés

IgG purifiées · polyclonal vs monoclonal · réactivité d’espèce. Matériel de référence : catalogue d’anticorps. Pour aller plus loin : antisérum vs IgG purifiées.