Glossario
Immunogeno
L'immunogeno è la sostanza usata per produrre un anticorpo. Perché i peptidi corti richiedono carrier KLH o BSA e perché la sequenza ne predice la specificità.
Un immunogeno è la sostanza impiegata per suscitare una risposta immunitaria e produrre un anticorpo. Non coincide con un antigene: ogni immunogeno è un antigene, ma molti antigeni, tra cui i peptidi corti, sono troppo piccoli per provocare da soli una risposta. Tali molecole sono apteni e hanno bisogno di un supporto.
Carrier e perché la sequenza dell'immunogeno è il campo chiave della scheda tecnica
I peptidi al di sotto di circa 5 kDa vengono coniugati a una proteina carrier: la KLH (emocianina di keyhole limpet) è preferita per l'immunizzazione perché è grande, altamente immunogenica e filogeneticamente distante dai mammiferi, mentre BSA o ovalbumina si usano per la piastra di screening, affinché gli anticorpi anti-carrier non vengano scambiati per anticorpi anti-peptide. Conta anche la chimica di coniugazione (glutaraldeide, EDC o maleimmide tramite una cisteina terminale aggiunta), perché l'estremità coniugata resta in gran parte nascosta al sistema immunitario e gli anticorpi saranno orientati verso l'estremità libera.
In pratica, la sequenza dell'immunogeno è il campo più predittivo di una scheda tecnica di un anticorpo. Indica quale epitopo è verosimilmente riconosciuto, quali analoghi daranno reattività crociata e se la stessa sequenza è conservata nella specie di interesse. Il peptide libero corrispondente è venduto come peptide bloccante.
Termini e materiali correlati
antisiero · ELISA. Materiale di riferimento: anticorpi, librerie di peptidi.