Anticorpo (policlonale vs monoclonale)

Un anticorpo è un'immunoglobulina che lega una specifica caratteristica molecolare, un epitopo. La distinzione policlonale/monoclonale descrive il modo in cui il reagente è stato prodotto e orienta quasi ogni decisione pratica nel lavoro di rilevamento dei peptidi.

Il compromesso

Gli anticorpi policlonali sono la popolazione eterogenea raccolta da un ospite immunizzato, tipicamente coniglio, capra o pecora, dopo l'immunizzazione con un immunogeno. Poiché rispondono molte linee di cellule B, il pool riconosce contemporaneamente diversi epitopi. Ne derivano elevata avidità, tolleranza a denaturazione o modifiche parziali e segnale intenso, al prezzo di una variabilità da lotto a lotto e di una disponibilità limitata, legata a un singolo prelievo di sangue da un animale.

Gli anticorpi monoclonali derivano da un singolo clone di cellule B immortalizzato come ibridoma (o espresso in forma ricombinante da sequenze clonate), per cui ogni molecola è identica e lega un solo epitopo. Sono rinnovabili e riproducibili indefinitamente, ma una singola mutazione puntiforme, un sito di modifica bloccato o un passaggio denaturante nel protocollo possono abolire completamente il legame.

Regola pratica per i peptidi corti: policlonali per cattura e immunoprecipitazione, dove l'avidità è d'aiuto, monoclonali ovunque occorra escludere la reattività crociata tra analoghi simili. Le coppie per ELISA sandwich combinano spesso uno di ciascun tipo.

Termini e materiali correlati

antisiero · IgG purificate · reattività di specie · peptide bloccante. Materiale di riferimento: catalogo degli anticorpi. Approfondimenti: gli anticorpi nella ricerca sui peptidi.