Woordenlijst
Immunogeen
Een immunogeen is de stof waarmee een antilichaam wordt opgewekt. Waarom korte peptiden KLH- of BSA-dragers nodig hebben en wat de sequentie voorspelt.
Een immunogeen is de stof die wordt gebruikt om een immuunrespons op te wekken en een antilichaam te genereren. Het is niet hetzelfde als een antigeen: elk immunogeen is een antigeen, maar veel antigenen — waaronder korte peptiden — zijn te klein om op eigen kracht een respons uit te lokken. Zulke moleculen zijn haptenen, en ze hebben hulp nodig.
Dragers en waarom de immunogeensequentie het belangrijkste datasheetveld is
Peptiden onder ongeveer 5 kDa worden aan een dragereiwit geconjugeerd: KLH (keyhole limpet hemocyanine) heeft de voorkeur voor immunisatie omdat het groot, sterk immunogeen en fylogenetisch ver van zoogdieren verwijderd is, terwijl BSA of ovalbumine voor de screeningsplaat wordt gebruikt, zodat antilichamen tegen de drager niet voor antilichamen tegen het peptide worden aangezien. Ook de conjugatiechemie doet ertoe — glutaaraldehyde, EDC of maleïmide via een toegevoegd terminaal cysteïne — omdat de gekoppelde terminus grotendeels voor het immuunsysteem verborgen is en antilichamen daardoor naar het vrije uiteinde neigen.
In de praktijk is de immunogeensequentie het meest voorspellende veld op een datasheet voor antilichamen. Ze vertelt u welk epitoop waarschijnlijk wordt herkend, welke analogen zullen kruisreageren en of dezelfde sequentie in uw soort van interesse geconserveerd is. Het bijpassende vrije peptide wordt verkocht als blokkerend peptide.
Gerelateerde termen en materiaal
antiserum · ELISA. Referentiemateriaal: antilichamen, peptidebibliotheken.