Glosář
Imunogen
Imunogen je látka použitá k vytvoření protilátky. Proč krátké peptidy potřebují nosiče KLH nebo BSA a proč sekvence imunogenu předpovídá specifitu.
Imunogen je látka použitá k vyvolání imunitní odpovědi a vytvoření protilátky. Není totéž co antigen: každý imunogen je antigenem, ale mnohé antigeny — mezi nimi krátké peptidy — jsou příliš malé na to, aby samy odpověď vyvolaly. Takové molekuly jsou hapteny a potřebují pomoc.
Nosiče a proč je sekvence imunogenu klíčovým údajem v technickém listu
Peptidy menší než přibližně 5 kDa se konjugují s nosným proteinem: pro imunizaci se preferuje KLH (hemocyanin přílipky Megathura crenulata), protože je velký, vysoce imunogenní a fylogeneticky vzdálený savcům, zatímco pro screeningovou destičku se používá BSA nebo ovalbumin, aby nebyly protilátky proti nosiči zaměněny za protilátky proti peptidu. Záleží i na chemii konjugace — glutaraldehyd, EDC nebo maleimid přes přidaný koncový cystein — protože navázaný konec je imunitnímu systému z velké části skryt a protilátky budou zaměřeny spíše na volný konec.
Prakticky je sekvence imunogenu nejvíce vypovídajícím údajem v technickém listu protilátky. Říká, který epitop je pravděpodobně rozpoznáván, které analogy budou zkříženě reagovat a zda je tatáž sekvence konzervována u Vámi zkoumaného druhu. Odpovídající volný peptid se prodává jako blokující peptid.
Související pojmy a materiály
antisérum · ELISA. Referenční materiál: protilátky, peptidové knihovny.