Antilichaam (polyklonaal versus monoklonaal)

Een antilichaam is een immunoglobuline dat een specifiek moleculair kenmerk bindt — een epitoop. Het onderscheid tussen polyklonaal en monoklonaal beschrijft hoe het reagens is geproduceerd, en het stuurt vrijwel elke praktische beslissing bij peptidedetectie.

De afweging

Polyklonale antilichamen zijn de heterogene populatie die na immunisatie met een immunogeen wordt gewonnen uit een geïmmuniseerde gastheer, doorgaans konijn, geit of schaap. Omdat veel B-cellijnen reageren, herkent de pool meerdere epitopen tegelijk. Dat geeft een hoge aviditeit, tolerantie voor gedeeltelijke denaturatie of modificatie en een sterk signaal — ten koste van variatie tussen lots en een eindige voorraad die aan één aftapping van één dier is gebonden.

Monoklonale antilichamen komen van één B-celkloon die als hybridoom is geïmmortaliseerd (of recombinant tot expressie is gebracht vanuit gekloneerde sequenties), zodat elk molecuul identiek is en één epitoop bindt. Ze zijn onbeperkt hernieuwbaar en reproduceerbaar, maar één puntmutatie, een geblokkeerde modificatieplaats of een denaturerende stap in uw protocol kan de binding volledig opheffen.

Vuistregel voor korte peptiden: polyklonalen voor vangst en immunoprecipitatie, waar aviditeit helpt, monoklonalen overal waar kruisreactiviteit tussen nauw verwante analogen moet worden uitgesloten. Paren voor sandwich-ELISA combineren vaak één van elk.

Gerelateerde termen en materiaal

antiserum · gezuiverd IgG · soortreactiviteit · blokkerend peptide. Referentiemateriaal: catalogus antilichamen. Verder lezen: antilichamen in peptideonderzoek.