Vries-dooicyclus

Een vries-dooicyclus is één volledige overgang van een oplossing van bevroren naar vloeibaar en weer terug. Stabiliteitsstudies geven de tolerantie op in aantallen van zulke herhalingen, omdat de schade cumulatief is en afhangt van het aantal overgangen, niet van de totale tijd in bevroren toestand.

Waarom vries-dooischade ertoe doet in peptideonderzoek

Tijdens de faseovergang spelen drie mechanismen. Terwijl ijs wordt gevormd, worden opgeloste stoffen uit het kristalrooster geweerd en concentreren ze sterk in de krimpende vloeibare fractie, zodat de lokale peptide- en zoutconcentraties ver boven de nominale waarden stijgen. Buffercomponenten kunnen op verschillende momenten kristalliseren — van natriumfosfaatbuffers is bekend dat de pH bij invriezen meer dan een eenheid verschuift — waardoor het peptide wordt blootgesteld aan omstandigheden die het bij kamertemperatuur nooit ervaart. En elk ijs-watergrensvlak biedt een oppervlak waarop gedeeltelijk ontvouwen ketens onomkeerbaar samenklonteren.

Het zichtbare resultaat is troebelheid, deeltjes of een daling van de gemeten potentie; het onzichtbare is een langzaam verlies van de intacte species dat alleen een nieuwe HPLC-controle aan het licht zou brengen. De standaardverdediging is een gereconstitueerde stock vóór het eerste invriezen te verdelen in aliquots voor eenmalig gebruik, met behulp van steriele lege flacons. Praktische details staan in de opslaggids en de gids over aliquoteren.

Gerelateerde termen

stabiliteit · afbraak · koudeketen