Cycle congélation–décongélation

Un cycle congélation–décongélation est un aller-retour complet d’une solution de l’état congelé à l’état liquide, puis de nouveau congelé. Les études de stabilité expriment la tolérance en nombre de répétitions, car les dommages sont cumulatifs et dépendent du nombre de transitions, et non du temps total passé à l’état congelé.

Pourquoi les dommages de congélation–décongélation comptent en recherche sur les peptides

Trois mécanismes interviennent lors du changement de phase. À mesure que la glace se forme, les espèces dissoutes sont exclues du réseau cristallin et se concentrent fortement dans la fraction liquide qui se réduit, de sorte que les concentrations locales en peptide et en sels dépassent largement les valeurs nominales. Les composants du tampon peuvent cristalliser à des points différents — les tampons phosphate de sodium sont connus pour décaler le pH de plus d’une unité à la congélation —, exposant le peptide à des conditions qu’il ne rencontre jamais à température ambiante. Enfin, chaque interface glace-eau offre une surface où des chaînes partiellement dépliées s’associent de façon irréversible.

Le résultat visible est un trouble, des particules ou une baisse de la puissance mesurée ; le résultat invisible est une perte lente de l’espèce intacte que seul un nouveau contrôle HPLC révélerait. La défense standard consiste à répartir une solution mère reconstituée en aliquotes à usage unique avant la première congélation, dans des flacons vides stériles. Les détails pratiques figurent dans le guide de stockage et le guide d’aliquotage.

Termes associés

stabilité · dégradation · chaîne du froid