Ciclo de congelación-descongelación

Un ciclo de congelación-descongelación es un recorrido completo de una solución desde el estado congelado al líquido y de vuelta. Los estudios de estabilidad expresan la tolerancia en número de repeticiones porque el daño es acumulativo y depende de cuántas transiciones se produzcan, no del tiempo total en congelación.

Por qué importa el daño por congelación-descongelación en la investigación con péptidos

Durante el cambio de fase actúan tres mecanismos. A medida que se forma el hielo, las especies disueltas quedan excluidas de la red cristalina y se concentran bruscamente en la fracción líquida menguante, de modo que las concentraciones locales de péptido y de sal aumentan muy por encima de las nominales. Los componentes del tampón pueden cristalizar en momentos distintos —se sabe que los tampones de fosfato sódico desplazan el pH más de una unidad al congelarse—, lo que expone el péptido a condiciones que nunca encuentra a temperatura ambiente. Y cada interfase hielo-agua ofrece una superficie en la que las cadenas parcialmente desplegadas se asocian de forma irreversible.

El resultado visible es turbidez, partículas o una caída de la potencia medida; el invisible es una pérdida lenta de la especie intacta que solo revelaría una comprobación por HPLC reciente. La defensa estándar consiste en dividir la solución madre reconstituida en alícuotas de un solo uso antes de la primera congelación, empleando viales vacíos estériles. Los detalles prácticos figuran en la guía de almacenamiento y en la guía de alícuotas.

Términos relacionados

estabilidad · degradación · cadena de frío