Glossário
Ponto isoelétrico (pI)
O pI é o pH ao qual um péptido não tem carga líquida — e onde é menos solúvel. Como o utilizar quando um frasco não fica límpido.
O ponto isoelétrico (pI) é o pH ao qual as cargas positivas e negativas de um péptido se equilibram e a carga líquida é zero. É determinado pela composição dos grupos ionizáveis: a amina N-terminal, o carboxilo C-terminal e as cadeias laterais de aspartato, glutamato, cisteína, histidina, lisina, arginina e tirosina. As sequências dominadas por resíduos básicos têm um pI elevado; as sequências ácidas têm um pI baixo.
Porque o ponto isoelétrico é importante na investigação de péptidos
No seu pI, um péptido não tem repulsão eletrostática entre moléculas, pelo que se encontra no seu mínimo de solubilidade. Este único facto explica uma grande parte dos problemas de reconstituição: um péptido que não fica límpido num diluente quase neutro tem frequentemente um pI próximo de 7, e deslocar a solução uma ou duas unidades de pH restaura a solubilidade. O corolário é uma regra prática — acidificar um péptido básico, alcalinizar um ácido e só depois diluir no tampão de trabalho.
O pI determina também o comportamento analítico. Condiciona a migração na focagem isoelétrica e a retenção em troca iónica, e interage com o contraião presente, uma vez que as formas de TFA e de acetato se comportam de maneira diferente. Consulte o guia de solubilidade e o guia de reconstituição.
Termos relacionados
hidrofílico · lipofílico · peso molecular