Glossario
Punto isoelettrico (pI)
Il pI è il pH al quale un peptide non ha carica netta, ed è quello in cui è meno solubile. Come usarlo quando una soluzione nel flaconcino non diventa limpida.
Il punto isoelettrico (pI) è il pH al quale le cariche positive e negative di un peptide si bilanciano e la carica netta è zero. È determinato dalla composizione dei gruppi ionizzabili: l'ammina N-terminale, il carbossile C-terminale e le catene laterali di aspartato, glutammato, cisteina, istidina, lisina, arginina e tirosina. Le sequenze dominate da residui basici hanno un pI elevato; quelle acide un pI basso.
Perché il punto isoelettrico è importante nella ricerca sui peptidi
Al proprio pI un peptide non presenta repulsione elettrostatica tra le molecole, per cui si trova al minimo di solubilità. Questo solo fatto spiega una larga parte dei problemi di ricostituzione: un peptide che non diventa limpido in un diluente quasi neutro ha spesso un pI vicino a 7, e spostare la soluzione di una o due unità di pH ne ripristina la solubilità. Il corollario è una regola pratica: acidificare un peptide basico, alcalinizzare un peptide acido e solo dopo diluire nel tampone di lavoro.
Il pI governa anche il comportamento analitico. Determina la migrazione nella focalizzazione isoelettrica e la ritenzione in scambio ionico, e interagisce con il controione presente, poiché le forme TFA e acetato si comportano in modo diverso. Si vedano la guida alla solubilità e la guida alla ricostituzione.
Termini correlati
idrofilo · lipofilo · peso molecolare