Glosario
Punto isoeléctrico (pI)
El pI es el pH al que un péptido no tiene carga neta y al que es menos soluble. Cómo aprovecharlo cuando un vial no termina de aclararse.
El punto isoeléctrico (pI) es el pH al que las cargas positivas y negativas de un péptido se equilibran y la carga neta es cero. Lo determina la composición de grupos ionizables: la amina N-terminal, el carboxilo C-terminal y las cadenas laterales de aspartato, glutamato, cisteína, histidina, lisina, arginina y tirosina. Las secuencias dominadas por residuos básicos tienen un pI alto; las secuencias ácidas, uno bajo.
Por qué importa el punto isoeléctrico en la investigación con péptidos
En su pI, un péptido no presenta repulsión electrostática entre moléculas, por lo que se encuentra en su mínimo de solubilidad. Ese solo hecho explica una gran parte de los problemas de reconstitución: un péptido que no se aclara en un diluyente casi neutro suele tener un pI cercano a 7, y alejar la solución una o dos unidades de pH restablece la solubilidad. El corolario es una regla práctica: acidificar un péptido básico, alcalinizar uno ácido y solo después diluir en el tampón de trabajo.
El pI también rige el comportamiento analítico. Determina la migración en el isoelectroenfoque y la retención en intercambio iónico, e interactúa con el contraión presente, ya que las formas de TFA y de acetato se comportan de manera distinta. Consulte la guía de solubilidad y la guía de reconstitución.
Términos relacionados
hidrófilo · lipófilo · peso molecular