Point isoélectrique (pI)

Le point isoélectrique (pI) est le pH auquel les charges positives et négatives d’un peptide s’équilibrent et où sa charge nette est nulle. Il est déterminé par la composition en groupes ionisables : l’amine N-terminale, le carboxyle C-terminal et les chaînes latérales de l’aspartate, du glutamate, de la cystéine, de l’histidine, de la lysine, de l’arginine et de la tyrosine. Les séquences dominées par des résidus basiques ont un pI élevé ; les séquences acides, un pI bas.

Pourquoi le point isoélectrique compte dans la recherche sur les peptides

À son pI, un peptide ne subit aucune répulsion électrostatique entre molécules : il se trouve à son minimum de solubilité. Ce seul fait explique une bonne partie des problèmes de reconstitution : un peptide qui ne devient pas limpide dans un diluant proche de la neutralité a souvent un pI voisin de 7, et déplacer la solution d’une ou deux unités de pH rétablit la solubilité. Il en découle une règle pratique : acidifier un peptide basique, alcaliniser un peptide acide, et seulement ensuite diluer dans le tampon de travail.

Le pI gouverne aussi le comportement analytique. Il détermine la migration en focalisation isoélectrique et la rétention en échange d’ions, et il interagit avec le contre-ion présent, les formes TFA et acétate se comportant différemment. Voir le guide de solubilité et le guide de reconstitution.

Termes associés

hydrophile · lipophile · masse moléculaire