Glossar
Antikörper (polyklonal vs. monoklonal)
Polyklonale Antikörper erkennen viele Epitope und variieren je Charge; monoklonale erkennen eines und sind reproduzierbar. Die Wahl für den Peptidnachweis.
Ein Antikörper ist ein Immunglobulin, das ein bestimmtes molekulares Merkmal bindet — ein Epitop. Die Unterscheidung polyklonal/monoklonal beschreibt, wie das Reagenz hergestellt wurde, und bestimmt nahezu jede praktische Entscheidung beim Peptidnachweis.
Die Abwägung
Polyklonale Antikörper sind die heterogene Population, die aus einem immunisierten Wirt — typischerweise Kaninchen, Ziege oder Schaf — nach Immunisierung mit einem Immunogen gewonnen wird. Da viele B-Zell-Linien antworten, erkennt der Pool mehrere Epitope gleichzeitig. Das ergibt hohe Avidität, Toleranz gegenüber partieller Denaturierung oder Modifikation und ein starkes Signal — auf Kosten von Chargenschwankungen und einer begrenzten Menge, die an die Blutentnahme eines einzelnen Tieres gebunden ist.
Monoklonale Antikörper stammen von einem einzelnen B-Zell-Klon, der als Hybridom immortalisiert (oder aus klonierten Sequenzen rekombinant exprimiert) wurde, sodass jedes Molekül identisch ist und ein einziges Epitop bindet. Sie sind unbegrenzt nachproduzierbar und reproduzierbar, doch eine einzige Punktmutation, eine blockierte Modifikationsstelle oder ein denaturierender Schritt in Ihrem Protokoll kann die Bindung vollständig aufheben.
Faustregel für kurze Peptide: polyklonale Antikörper für Capture und Immunpräzipitation, wo Avidität hilft, monoklonale überall dort, wo Kreuzreaktivität zwischen eng verwandten Analoga ausgeschlossen werden muss. Sandwich-ELISA-Paare kombinieren häufig je einen von beiden.
Verwandte Begriffe und Materialien
Antiserum · gereinigtes IgG · Speziesreaktivität · Blocking-Peptid. Referenzmaterial: Antikörperkatalog. Weiterführende Lektüre: Antikörper in der Peptidforschung.