Anticorps (polyclonal vs monoclonal)

Un anticorps est une immunoglobuline qui se lie à un motif moléculaire précis — un épitope. La distinction polyclonal/monoclonal décrit le mode de production du réactif, et elle conditionne presque toutes les décisions pratiques dans les travaux de détection de peptides.

Le compromis

Les anticorps polyclonaux sont la population hétérogène récoltée chez un hôte immunisé, généralement lapin, chèvre ou mouton, après immunisation par un immunogène. Comme de nombreuses lignées de lymphocytes B répondent, le mélange reconnaît plusieurs épitopes à la fois. Il en résulte une forte avidité, une tolérance à une dénaturation ou une modification partielle, et un signal intense — au prix d’une variabilité d’un lot à l’autre et d’un approvisionnement limité, lié à une saignée d’un seul animal.

Les anticorps monoclonaux proviennent d’un clone unique de lymphocyte B immortalisé sous forme d’hybridome (ou sont exprimés de façon recombinante à partir de séquences clonées), de sorte que chaque molécule est identique et se lie à un seul épitope. Ils sont renouvelables et reproductibles indéfiniment, mais une simple mutation ponctuelle, un site de modification bloqué ou une étape dénaturante dans votre protocole peut abolir totalement la liaison.

Règle empirique pour les peptides courts : des polyclonaux pour la capture et l’immunoprécipitation, où l’avidité aide, des monoclonaux partout où la réactivité croisée entre analogues proches doit être exclue. Les paires d’ELISA sandwich associent souvent un anticorps de chaque type.

Termes et matériels associés

antisérum · IgG purifiées · réactivité d’espèce · peptide bloquant. Matériel de référence : catalogue d’anticorps. Pour aller plus loin : les anticorps en recherche sur les peptides.