Disulfidový můstek

Disulfidový můstek je kovalentní vazba vzniklá oxidací thiolových skupin dvou cysteinových zbytků na spojení síra–síra. Je to jediné běžné kovalentní příčné propojení v přírodních peptidech a proteinech a odstraňuje dva atomy vodíku, takže peptid s můstkem je o 2 Da lehčí než jeho redukovaná forma — rozdíl viditelný hmotnostní spektrometrií.

Proč jsou disulfidové můstky ve výzkumu peptidů důležité

Přeměňují ohebný řetězec na konformačně omezenou smyčku, což je často to, co vazbu na receptor vůbec umožňuje. Oxytocin i vazopresin nesou každý jediný můstek uzavírající kruh o šesti zbytcích; somatostatin, inzulin a mnoho peptidů odvozených z toxinů na nich zcela závisí. Syntetický peptid dodaný v redukované formě bez můstku může být podle sekvence chemicky správný, a přesto v testu neaktivní.

Pozornost si zaslouží dvě cesty selhání. K přeskupení (scrambling) dochází, když se peptid s více cysteiny během oxidace složí do nesprávného párování, čímž vznikne izomer se stejnou hmotností, ale odlišnou retencí v HPLC. Redukce složkami pufru obsahujícími thioly může otevřít můstek, který byl vytvořen správně. Užitečný certifikát analýzy uvádí konektivitu disulfidů, nikoli pouze hmotnost. Související: cyklický peptid a somatostatin.

Související pojmy

oxidace · lineární peptid · čtení peptidových sekvencí