Glossário
Sal de TFA
A maioria dos péptidos sintéticos é fornecida como sal de trifluoroacetato. Quanto da massa do frasco é contraião e quando o TFA interfere em ensaios celulares.
Sal de TFA significa que o péptido é fornecido com trifluoroacetato como contraião, emparelhado com os resíduos básicos de carga positiva da sequência. É a forma por defeito porque o ácido trifluoroacético é utilizado tanto para clivar o péptido da resina no final da SPPS como agente de emparelhamento iónico na HPLC preparativa de fase reversa, pelo que está presente em todos os passos a jusante, salvo se for deliberadamente trocado.
Porque a forma de sal de TFA é importante na investigação de péptidos
Há duas consequências. Primeiro, a contabilização da massa: o teor de TFA situa-se habitualmente entre cerca de 10% e 25% do peso bruto, consoante o número de resíduos básicos da sequência, pelo que um frasco rotulado com 5 mg pode conter consideravelmente menos de 5 mg de péptido. Qualquer cálculo de molaridade deve, portanto, partir do teor líquido de péptido indicado no certificado de análise e não do rótulo.
A segunda é a interferência nos ensaios. O TFA residual é descrito como citotóxico para algumas linhas celulares e como afetando os parâmetros de proliferação celular em concentrações muito inferiores às que prejudicam o péptido, pelo que o trabalho celular exige frequentemente o sal de acetato. O TFA produz também uma banda característica no infravermelho que pode confundir trabalho espectroscópico. Veja como ler um COA.
Termos relacionados
pureza · excipiente · sintético