Glosario
Sal de TFA
La mayoría de los péptidos sintéticos se suministran como sales de trifluoroacetato. Cuánta masa es contraión y cuándo interfiere el TFA en ensayos celulares.
Sal de TFA significa que el péptido se suministra con trifluoroacetato como contraión, emparejado con los residuos básicos de la secuencia, que tienen carga positiva. Es la forma por defecto porque el ácido trifluoroacético se emplea tanto para escindir el péptido de la resina al final de la SPPS como agente de apareamiento iónico en la HPLC preparativa de fase inversa, de modo que está presente en todos los pasos posteriores salvo que se intercambie deliberadamente.
Por qué importa la forma de sal de TFA en la investigación con péptidos
Tiene dos consecuencias. La primera es el balance de masas: el contenido de TFA oscila habitualmente entre un 10% y un 25% del peso bruto según el número de residuos básicos de la secuencia, de modo que un vial etiquetado como 5 mg puede contener bastante menos de 5 mg de péptido. Por eso todo cálculo de molaridad debe partir del contenido peptídico neto del certificado de análisis, no de la etiqueta.
La segunda es la interferencia en los ensayos. Se ha descrito que el TFA residual es citotóxico para algunas líneas celulares y que afecta a las variables de proliferación celular a concentraciones muy inferiores a las que dañan al péptido, por lo que el trabajo celular suele requerir en su lugar la sal de acetato. El TFA produce además una banda infrarroja característica que puede alterar los trabajos espectroscópicos. Consulte cómo leer un COA.
Términos relacionados
pureza · excipiente · sintético