Endotoxină

Endotoxina este lipopolizaharidul (LPS) din membrana externă a bacteriilor Gram-negative. Este un activator puternic al receptorului Toll-like 4, declanșând semnalizare inflamatorie la concentrații de ordinul picogramelor pe mililitru, și se măsoară în unități de endotoxină (EU), unde aproximativ 10 EU corespund la 1 ng de LPS de referință.

De ce contează endotoxina în cercetarea peptidelor

Este o specificație separată deoarece testarea obișnuită a purității nu o poate detecta. O peptidă poate avea o puritate HPLC de 99% și totuși să conțină suficientă endotoxină pentru a domina un parametru imunologic, deoarece LPS nu este o impuritate înrudită cu peptida și nu apare în cromatogramă. În culturile celulare și în testele pe macrofage și imune, contaminarea produce răspunsuri citokinice care sunt ușor atribuite în mod eronat peptidei testate — o sursă bine documentată de rezultate nereproductibile.

Două căi de contaminare domină: expresia recombinantă în gazde bacteriene, unde LPS se copurifică din gazda însăși, și apa sau sticlăria din fluxurile de lucru altfel sintetice. Endotoxina este termostabilă și rezistă autoclavării, astfel încât trebuie exclusă, nu distrusă. Testarea se face prin testul LAL, raportat în certificatul de analiză doar la cerere expresă. Consultați interpretarea unui COA și testarea de către terți.

Termeni înrudiți

puritate