Endotoxine

L’endotoxine est le lipopolysaccharide (LPS) de la membrane externe des bactéries à Gram négatif. C’est un puissant activateur du récepteur Toll-like 4, déclenchant une signalisation inflammatoire à des concentrations de l’ordre du picogramme par millilitre ; elle se mesure en unités d’endotoxine (EU), environ 10 EU correspondant à 1 ng de LPS de référence.

Pourquoi l’endotoxine compte en recherche sur les peptides

C’est une spécification à part, car les analyses de pureté ordinaires ne la voient pas. Un peptide peut être pur à 99% en HPLC et porter pourtant assez d’endotoxine pour dominer une lecture immunologique, puisque le LPS n’est pas une impureté apparentée au peptide et n’apparaît pas sur le chromatogramme. En culture cellulaire, dans les essais sur macrophages et les essais immunologiques, la contamination produit des réponses cytokiniques facilement attribuées à tort au peptide testé — une source bien documentée de résultats non reproductibles.

Deux voies de contamination dominent : l’expression recombinante dans des hôtes bactériens, où le LPS est co-purifié à partir de l’hôte lui-même, et l’eau ou la verrerie dans des procédés par ailleurs synthétiques. L’endotoxine est thermostable et résiste à l’autoclavage ; elle doit donc être exclue plutôt que détruite. Le dosage se fait par test LAL, rapporté sur le certificat d’analyse uniquement sur demande spécifique. Voir lire un COA et les analyses par un tiers.

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