Endotoxina

La endotoxina es el lipopolisacárido (LPS) de la membrana externa de las bacterias gramnegativas. Es un potente activador del receptor de tipo Toll 4, que desencadena señalización inflamatoria a concentraciones de picogramos por mililitro, y se mide en unidades de endotoxina (UE), donde aproximadamente 10 UE corresponden a 1 ng de LPS de referencia.

Por qué importa la endotoxina en la investigación con péptidos

Es una especificación aparte porque los análisis de pureza habituales no pueden detectarla. Un péptido puede tener un 99% de pureza por HPLC y aun así contener suficiente endotoxina para dominar una variable inmunológica, ya que el LPS no es una impureza relacionada con el péptido y no aparece en el cromatograma. En cultivos celulares y ensayos con macrófagos e inmunitarios, la contaminación produce respuestas de citocinas que se atribuyen fácilmente por error al péptido estudiado, una fuente bien documentada de resultados irreproducibles.

Predominan dos vías de contaminación: la expresión recombinante en huéspedes bacterianos, donde el LPS se copurifica a partir del propio huésped, y el agua o el material de vidrio en flujos de trabajo por lo demás sintéticos. La endotoxina es termoestable y resiste el autoclave, por lo que debe excluirse en lugar de destruirse. Se analiza mediante el ensayo LAL, que figura en el certificado de análisis solo cuando se solicita específicamente. Consulte cómo leer un COA y el análisis por terceros.

Términos relacionados

pureza