IgG purificat

IgG purificat înseamnă că fracția de imunoglobulină G a fost separată de restul antiserului. Eticheta ascunde o distincție importantă, iar o fișă tehnică care nu precizează metoda folosită este incompletă.

Două purificări foarte diferite

Purificarea cu proteină A sau proteină G captează IgG prin regiunea sa Fc. Îndepărtează albumina, proteazele și proteinele serice non-IgG și produce o soluție cu concentrație cunoscută în mg/mL, potrivită pentru conjugare — însă toate IgG ale animalului sunt captate, astfel încât fracția specifică țintei poate reprezenta în continuare doar un mic procent din total. Proteina A și proteina G diferă prin afinitatea pentru specia-gazdă și subclase, motiv pentru care gazda este întotdeauna precizată.

Purificarea prin afinitate pentru antigen trece serul peste peptida imobilizată și eluează doar anticorpii care se leagă de aceasta. Produsul este IgG specific țintei, oferă un fond semnificativ mai redus și este alegerea potrivită pentru imunohistochimie, conjugare și orice ELISA cantitativ. Randamentul este mult mai mic, iar eluția la pH scăzut sau cu agenți caotropi poate deteriora clonele cu cea mai mare aviditate.

În ambele cazuri, IgG purificat este declarat în mg/mL, permițând o titrare reală în locul estimărilor pe bază de factor de diluție specifice serului integral.

Termeni și materiale înrudite

policlonal vs monoclonal · peptidă de blocare · imunogen. Material de referință: anticorpi, anticorpi marcați. Lectură suplimentară: antiser vs IgG purificat.