IgG purificada

IgG purificada significa que la fracción de inmunoglobulina G se ha separado del resto del antisuero. La etiqueta oculta una distinción importante, y una ficha técnica que no especifica el método empleado está incompleta.

Dos purificaciones muy distintas

La purificación con proteína A o proteína G captura la IgG a través de su región Fc. Elimina la albúmina, las proteasas y las proteínas del suero que no son IgG, y da una solución de concentración conocida en mg/mL apta para la conjugación; pero se captura toda la IgG del animal, por lo que la fracción específica de la diana puede seguir siendo solo un pequeño porcentaje del total. La proteína A y la proteína G difieren en su afinidad por las especies huésped y las subclases, razón por la que siempre se indica el huésped.

La purificación por afinidad al antígeno hace pasar el suero sobre el péptido inmovilizado y eluye solo los anticuerpos que se unen a él. El producto es IgG específica de la diana, con un fondo notablemente menor, y es la opción adecuada para inmunohistoquímica, conjugación y cualquier ELISA cuantitativo. El rendimiento es mucho menor, y la elución a pH bajo o con agentes caotrópicos puede dañar los clones de mayor avidez.

En ambos casos, la IgG purificada se expresa en mg/mL, lo que permite una titulación real en lugar de las conjeturas sobre el factor de dilución propias del suero completo.

Términos y material relacionados

policlonal frente a monoclonal · péptido de bloqueo · inmunógeno. Material de referencia: anticuerpos, anticuerpos marcados. Lectura adicional: antisuero frente a IgG purificada.