Péptido de bloqueo

Un péptido de bloqueo (también péptido competidor o péptido neutralizante) es el péptido sintético libre correspondiente a la secuencia inmunógena utilizada para generar un anticuerpo determinado. Se suministra junto con el anticuerpo con un único fin: demostrar que la señal observada procede del epítopo previsto.

Cómo funciona el control

El anticuerpo se preincuba con un exceso molar del péptido —habitualmente de varias a cien veces, optimizado de forma empírica— antes de aplicarlo al blot, la placa o el corte. Si la señal es específica del epítopo, debería desaparecer o reducirse mucho; las bandas que persisten son inespecíficas o reflejan un epítopo distinto con reactividad cruzada. Las condiciones con y sin bloqueo deben procesarse en paralelo sobre la misma muestra, y conviene incluir una condición solo con péptido para confirmar que el propio péptido no aporta señal.

Las limitaciones deben exponerse con claridad: el control demuestra dependencia del epítopo, no que la proteína teñida sea la que se supone. Una proteína no relacionada que comparta ese epítopo lineal corto se comportaría de forma idéntica. La inactivación o el silenciamiento génico siguen siendo el control de especificidad más sólido; el bloqueo con péptido es el práctico.

Términos y material relacionados

policlonal frente a monoclonal · IgG purificada · ELISA · secuencia nativa. Material de referencia: anticuerpos, bibliotecas de péptidos. Lectura adicional: anticuerpos en la investigación con péptidos.